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请教一个关于测序结果的问题
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请教一个关于测序结果的问题
年前做了一个测序,结果很奇怪,虽然测序结果是测到了,但是结果和目的片段进行比对,发现测序结果分为两部分,前300正是自己的目的片段,而后300则是目的片段的反向序列,也就是说一个测序结果上出现了两个目的片段,一个正向,一个反向,不知道是怎么一回事,请教各位高手,同时祝大家元宵节快乐
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1楼
2012-02-06 10:30:33
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Originally posted by
bst5
at 2012-02-06 11:12:46:
确定你的连接产物大小是对的吗?还有连上的产物是你目的的两倍啊
应该是没有问题的
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4楼
2012-02-06 11:41:07
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楼
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Originally posted by
wzqno
at 2012-02-06 11:27:40:
你得说清楚你是用的什么载体,TA克隆还是酶切后连的,不然不好分析
我是PCR产物来的,麻烦了
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5楼
2012-02-06 11:41:37
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:
Originally posted by
wzqno
at 2012-02-06 13:49:43:
PCR产物直接测序??还是PCR产物连到T载体上测序?
PCR产物直接测序
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7楼
2012-02-06 13:56:57
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Originally posted by
Charles-glh
at 2012-02-06 17:31:37:
测序是分开测的,正反引物按照一个方向测序的,你的结果应该是对的!
应该不是吧,我先用了上游测序出现了这个结果,后来使用下游测,结果良好,并没有出现这种情况
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15楼
2012-02-10 13:45:00
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Originally posted by
c3024034
at 2012-02-06 18:51:50:
你的PCR反应引物设计有无问题啊?
我也在怀疑这个,但是要是引物有多个结合位点的话测序结果不应该是良好啊,我是用oligo6.0设计的,设计上看不出啥问题来
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16楼
2012-02-10 13:46:08
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