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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有关测序问题，拜求大家回答
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love三人游

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关测序问题，拜求大家回答

我测序结果的反向互补序列与我目的基因完全一致，这个结果是什么意思？能用来做转基因吗?怎么会是这样的结果？还有，测序引物上游可不可以直接找20bp片段，然后下游找一段，再反向互补？跪求，新人，感激不尽！！！！！！！！！！！！
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1楼 2012-01-05 21:09:18
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love三人游

新虫 (初入文坛)
2楼2012-01-05 21:15:09
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cnliu51

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果是克隆测序，这个结果很正常，因为克隆的序列可能正向载体，也可能反向插入。
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3楼2012-01-05 21:57:00
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imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
既然是反向互补，那不就是一样的么
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悠哉游哉做实验，成兮败兮我随便
4楼2012-01-05 21:57:10
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love三人游

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by imyting at 2012-01-05 21:57:10:
既然是反向互补，那不就是一样的么

恩，是这样吗？我问三博远志测序说这样的结果是插反了
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5楼2012-01-06 11:42:58
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-06 13:47:59
测序用的是载体通用引物吧，如果测序结果与你基因互补，那可能反向插入了。
如果你用的单酶切连接，这种情况肯定会出现，建议单酶切连接时，筛选阳性克隆引物一条采用载体通用引物，一条采用基因特异性引物。
赞一下(2人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
6楼2012-01-06 13:42:10
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