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love三人游

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关测序问题,拜求大家回答

我测序结果的反向互补序列与我目的基因完全一致,这个结果是什么意思?能用来做转基因吗?怎么会是这样的结果?还有,测序引物上游可不可以直接找20bp片段,然后下游找一段,再反向互补?跪求,新人,感激不尽!!!!!!!!!!!!
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imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
既然是反向互补,那不就是一样的么
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
4楼2012-01-05 21:57:10
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cnliu51

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果是克隆测序,这个结果很正常,因为克隆的序列可能正向载体,也可能反向插入。
3楼2012-01-05 21:57:00
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love三人游

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by imyting at 2012-01-05 21:57:10:
既然是反向互补,那不就是一样的么

恩,是这样吗?我问三博远志测序说这样的结果是插反了
5楼2012-01-06 11:42:58
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-06 13:47:59
测序用的是载体通用引物吧,如果测序结果与你基因互补,那可能反向插入了。
如果你用的单酶切连接,这种情况肯定会出现,建议单酶切连接时,筛选阳性克隆引物一条采用载体通用引物,一条采用基因特异性引物。
Thank-you,so-blue.
6楼2012-01-06 13:42:10
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