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love三人游

新虫 (初入文坛)

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[求助] 有关测序问题，拜求大家回答

我测序结果的反向互补序列与我目的基因完全一致，这个结果是什么意思？能用来做转基因吗?怎么会是这样的结果？还有，测序引物上游可不可以直接找20bp片段，然后下游找一段，再反向互补？跪求，新人，感激不尽！！！！！！！！！！！！

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1楼 2012-01-05 21:09:18

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love三人游

新虫 (初入文坛)

2楼2012-01-05 21:15:09

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cnliu51

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

如果是克隆测序，这个结果很正常，因为克隆的序列可能正向载体，也可能反向插入。

3楼2012-01-05 21:57:00

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imyting

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

既然是反向互补，那不就是一样的么

悠哉游哉做实验，成兮败兮我随便

4楼2012-01-05 21:57:10

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love三人游

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

楼: Originally posted by imyting at 2012-01-05 21:57:10:
既然是反向互补，那不就是一样的么

恩，是这样吗？我问三博远志测序说这样的结果是插反了

5楼2012-01-06 11:42:58

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susizheng

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【答案】应助回帖

★
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小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-06 13:47:59

测序用的是载体通用引物吧，如果测序结果与你基因互补，那可能反向插入了。
如果你用的单酶切连接，这种情况肯定会出现，建议单酶切连接时，筛选阳性克隆引物一条采用载体通用引物，一条采用基因特异性引物。

赞一下(2人)

Thank-you，so-blue.

6楼2012-01-06 13:42:10

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