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zw198626

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 请教一个基因的扩增,TA克隆问题

各位大侠,
小弟最近在用mRNA扩增一个基因,跑胶后电泳带子特异。直接用PCR产物未经纯化或切胶纯化直接做TA克隆。抽提转化子的质粒,跑胶将变大的质粒送测序。但是得到的连接产物,经测序发现大小正确,但是序列为一段没有任何意义的DNA序列。在NCBI做blast也找不到任何匹配的序列。不知各位有没有这样的经历?或有大侠给指点下迷津的?

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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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西瓜(金币+1): 有道理啊 2012-02-22 18:44:21
所以每次测序一定要2~3个平行样,这样才不至于是不知道是因为测序问题,还是因为自己的PCR的问题。
总有一天我要修改用户名。
7楼2012-02-22 16:10:20
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