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请教一个基因的扩增,TA克隆问题
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zw198626
铁杆木虫
(小有名气)
应助: 2
(幼儿园)
金币: 6711.5
散金: 12
帖子: 126
在线: 97.3小时
虫号: 1294192
注册: 2011-05-13
专业: 生物化学
[
求助
]
请教一个基因的扩增,TA克隆问题
各位大侠,
小弟最近在用mRNA扩增一个基因,跑胶后电泳带子特异。直接用PCR产物未经纯化或切胶纯化直接做TA克隆。抽提转化子的质粒,跑胶将变大的质粒送测序。但是得到的连接产物,经测序发现大小正确,但是序列为一段没有任何意义的DNA序列。在NCBI做blast也找不到任何匹配的序列。不知各位有没有这样的经历?或有大侠给指点下迷津的?
再次拜谢!
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1楼
2012-02-03 10:16:40
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至尊木虫
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专业: 基因表达调控与表观遗传学
【答案】应助回帖
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西瓜(金币+1): 有道理啊 2012-02-22 18:44:21
所以每次测序一定要2~3个平行样,这样才不至于是不知道是因为测序问题,还是因为自己的PCR的问题。
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总有一天我要修改用户名。
7楼
2012-02-22 16:10:20
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