24小时热门版块排行榜    

查看: 1854  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

[求助] 在克隆的时候你遇见过这样的问题吗?

最近在做RACE的克隆,有两个基因的5‘断在PCR的时候只有400bp左右的长度,回收产物做克隆之后菌液的序列长度就变成了1000多,拿去测序的结果却什么都没有,上游引物和下游引物中间就只有个AC,连续做了两次结果都是一样的,请问这是什么原因造成的呢?
回复此楼
生命在于折腾~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-02-02 14:28:30:
引物扩过质粒吗?污染了吗?

不打算做质粒了,有点麻烦,呵呵~
生命在于折腾~
9楼2012-02-05 17:29:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

amilie030312

金虫 (正式写手)

载体多长,是不是没连上空载啊
2楼2012-02-02 12:59:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yabxxh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2012-02-02 18:31:13
这个应该是没连上,也就是实验失败了。
这种情况我遇到过,酶切鉴定跟我的片段一样大小,可是拿去测序测出来什么都不是。
你的测序引物没什么问题的话就重新做吧。
重点检查一下你的感受态,以及你的纯化试剂盒。都没问题的话,直接拿你的PCR回收产物去测序吧,看一下是不是一个错配片段。
好运。
3楼2012-02-02 13:32:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物扩过质粒吗?污染了吗?
jiayoubashaonian
4楼2012-02-02 14:28:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +5 Ncdx123456 2026-03-13 6/300 2026-03-15 23:39 by lovewei0727
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 301求调剂 +3 归零lbm 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:20 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 一志愿山大 321分 求调剂 +7 每天散步 2026-03-09 8/400 2026-03-14 02:18 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂! +4 朔朔话 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:38 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:12 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
信息提示
请填处理意见