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xy19860508铜虫 (小有名气)
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[求助]
关于RNA转录后的CDNA模板进行PCR的一些问题的请教
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小弟近日对病毒的rna进行抽提（Trizol法），得到RNA之后用宝生物的反转录试剂盒进行转录，得到cDNA。 以得到的cDNA做为模板来进行PCR反应。先用针对某基因的短片段(300bp)的引物进行检测，能得到阳性的结果（附带的阴性对照未出现结果）。而对该检测存在的基因进行全基因（1700bp）扩增的时候，无片段扩增（全基因的扩增引物无问题，因为我在暑假的时候用该对引物成功的扩增出了片段）。 小弟不知道是哪一个环节出错，求指点，不盛感激。（初步怀疑为抽提得到的RNA为断裂的片段，因此无法得到长片段的PCR产物） 求高人指点 |
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2楼2012-01-09 10:15:49
xy19860508
铜虫 (小有名气)
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3楼2012-01-09 12:58:38