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xy19860508铜虫 (小有名气)
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[求助]
关于RNA转录后的CDNA模板进行PCR的一些问题的请教
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小弟近日对病毒的rna进行抽提(Trizol法),得到RNA之后用宝生物的反转录试剂盒进行转录,得到cDNA。 以得到的cDNA做为模板来进行PCR反应。先用针对某基因的短片段(300bp)的引物进行检测,能得到阳性的结果(附带的阴性对照未出现结果)。而对该检测存在的基因进行全基因(1700bp)扩增的时候,无片段扩增(全基因的扩增引物无问题,因为我在暑假的时候用该对引物成功的扩增出了片段)。 小弟不知道是哪一个环节出错,求指点,不盛感激。(初步怀疑为抽提得到的RNA为断裂的片段,因此无法得到长片段的PCR产物) 求高人指点 |
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2楼2012-01-09 10:15:49
xy19860508
铜虫 (小有名气)
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3楼2012-01-09 12:58:38














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