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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[求助] realtimePCR引物

想设计realtimePCR的引物,不知realtime PCR的引物和普通PCR的引物有何区别,片段大小是否有特殊要求呢?
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shaquila

金虫 (正式写手)


wanhscn(金币+1): 鼓励交流分享经验! 2012-01-04 20:29:19
有很多规则,其实也有轻重的。不能有二聚体,影响扩增效率,用SYBR还有非特异性扩增。另外引物TM应该合适两步法一般反应温度都是六十度,不要轻易改,因为你可能要多个基因在一个体系跑,太低的TM在六十度影响结合效率,引物太长结合效率也会降低,而且非特异性扩增也会增加
3楼2012-01-04 18:48:50
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