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zhouxw1987

铁虫 (初入文坛)

[求助] 新手提RNA,电泳图看不懂

今天第一次提RNA,用普通琼脂糖凝胶1.6%,电压为180V,跑了电泳图,看不懂是啥意思,最下面那个很亮的地方是什么东西?是降解了么?但是又不像是拖带啊?请各位前辈指点指点,能用此RNA做反转录么?万分感谢!
 
图一、电泳5min时的图片
 
图二、电泳10min时的图片
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励完整应助 2011-12-27 21:21:39
基因组DNA 0.6% gel  4-5v/cm  gDNA大,要慢慢跑出来才漂亮。
1-5kb DNA  1%gel     5-8v/cm 随便跑跑即可
200-500bp  2%         约6v/cm 问题不大。

至于RNA电泳(普通琼脂糖,非变性),因为怕它电泳时间过长,降解,所以感觉上电泳时间控制在30min以内会比较好。
1-1.5%的胶都有人用, 7v/cm左右差不多,在溴酚兰跑出来1-2cm。不同大小的点样孔上不同的量(小孔建议200ng)
多跑几次自己摸索摸索,找出自己最适合的条件。
伟大航线....
9楼2011-12-26 11:21:06
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查看全部 19 个回答

我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
只有5s 貌似全降解了~~~我感觉是。LS回答吧
2楼2011-12-25 20:48:10
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dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-26 11:42:29
西瓜: 回帖置顶 2011-12-28 12:49:31
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-28 12:49:41
你这个提的不好,从上到下一次是28s, 18s 和5s,你的28s和18s条带很弱,基本上都是5s。不知道你想做什么实验,如果还有原材料再提一次吧,如果没有那就只好用这个来扩增你的目的基因了
3楼2011-12-26 07:09:40
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julietguo

银虫 (正式写手)

我最近一次提的RNA也是,反转录之后做PCR,得到的条带连100bp都不到,真怀疑是不是降解了
4楼2011-12-26 08:19:37
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