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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新手提RNA，电泳图看不懂
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zhouxw1987

铁虫 (初入文坛)

[求助] 新手提RNA，电泳图看不懂

今天第一次提RNA，用普通琼脂糖凝胶1.6%，电压为180V，跑了电泳图，看不懂是啥意思，最下面那个很亮的地方是什么东西？是降解了么？但是又不像是拖带啊？请各位前辈指点指点，能用此RNA做反转录么？万分感谢！
 
图一、电泳5min时的图片
 
图二、电泳10min时的图片
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1楼 2011-12-25 20:20:16
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励完整应助 2011-12-27 21:21:39
基因组DNA 0.6% gel  4-5v/cm  gDNA大，要慢慢跑出来才漂亮。
1-5kb DNA  1%gel     5-8v/cm 随便跑跑即可
200-500bp  2%         约6v/cm 问题不大。

至于RNA电泳（普通琼脂糖，非变性），因为怕它电泳时间过长，降解，所以感觉上电泳时间控制在30min以内会比较好。
1-1.5%的胶都有人用， 7v/cm左右差不多，在溴酚兰跑出来1-2cm。不同大小的点样孔上不同的量（小孔建议200ng）
多跑几次自己摸索摸索，找出自己最适合的条件。
赞一下(3人) 回复此楼
伟大航线....
9楼2011-12-26 11:21:06
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只有5s 貌似全降解了~~~我感觉是。LS回答吧
赞一下 回复此楼
2楼2011-12-25 20:48:10
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dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-26 11:42:29
西瓜: 回帖置顶 2011-12-28 12:49:31
西瓜(金币+3): Good！ 2011-12-28 12:49:41
你这个提的不好，从上到下一次是28s， 18s 和5s，你的28s和18s条带很弱，基本上都是5s。不知道你想做什么实验，如果还有原材料再提一次吧，如果没有那就只好用这个来扩增你的目的基因了
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-12-26 07:09:40
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julietguo

银虫 (正式写手)
我最近一次提的RNA也是，反转录之后做PCR，得到的条带连100bp都不到，真怀疑是不是降解了
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4楼2011-12-26 08:19:37
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