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popfirst

禁虫 (初入文坛)

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amilie030312

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

换个公司的酶吧,找那种适合复杂模板的酶。
2楼2011-11-28 13:42:37
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在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-11-28 17:57:13
popfirst(金币+5): 好吧,andy,我试试 2011-11-29 00:41:27
wanhscn(金币+2, MolEPI+1): 破格授予专家指数一枚! 2011-12-20 15:00:01
我觉得直接用Mix不好么?很多公司的mix直接用,做DGGE效果很好啊。我做了很多次DGGE了,都没有什么问题。
3楼2011-11-28 14:36:32
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在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流经验哦 2011-11-28 17:57:23
popfirst(金币+5): 2011-12-17 00:45:06
而且,降落时PCR跟普通PCR跑出来的产物做DGGE,图谱没有差异,我比较过。
4楼2011-11-28 14:37:02
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thestormcong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励应助 2011-11-28 22:50:41
popfirst(金币+3): 试一下 2011-11-29 00:42:07
我做的也是16sv3区的扩增,后来查看了一篇外文文献,参考了上面的方法,结果跑出来条带很单一,大小也一致。程序如下:95℃ 5min
    94℃ 30s     58℃ -53℃ 30s  72℃ 30s    10个循环
    94℃ 30s     53℃ 30s           72℃ 30s    25个循环
     72℃ 10min               这个程序没有问题。
5楼2011-11-28 19:16:15
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xudabin98

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

前面那个循环改成15,后面那个用20,酶用rTaq。
6楼2011-11-29 08:01:33
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ironicsjq

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

popfirst(金币+2): 2011-12-03 20:55:30
不用跑降落PCR,没区别。另外,我跑降落PCR是65-55度,2个循环降1度,20个循环,55度再20个循环。
7楼2011-12-02 11:25:01
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elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

popfirst(金币+5): 2011-12-03 20:55:15
虽然有许多人说普通PCR和降落PCR没有什么区别,不过据研究,如果扩增V6-V8区域的还是用普通PCR较好,不要用降落PCR,对于V3区域没有什么影响。
8楼2011-12-03 19:33:01
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分子实验哥

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币-10): 坚决打击广告 2011-12-14 16:24:34
西瓜:编辑内容 2011-12-14 16:24
--广告内容已删除--

[ Last edited by 西瓜 on 2011-12-14 at 16:24 ]
9楼2011-12-14 09:42:01
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love~bao

新虫 (初入文坛)

你是不是酶的量用多了呀,或者是引物量呢 我用的25uL体系,dNTP2ul; taq酶:0.2ul; 10×buffer:2.5ul;

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2011-12-19 17:51:06
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