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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 降落PCR一直 跑不出来（用于DGGE）
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popfirst

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【分子生物】EPI帖

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1楼 2011-11-28 00:04:24
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在雨中

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-11-28 17:57:13
popfirst(金币+5): 好吧，andy，我试试 2011-11-29 00:41:27
wanhscn(金币+2, MolEPI+1): 破格授予专家指数一枚！ 2011-12-20 15:00:01
我觉得直接用Mix不好么？很多公司的mix直接用，做DGGE效果很好啊。我做了很多次DGGE了，都没有什么问题。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-11-28 14:36:32
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amilie030312

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

换个公司的酶吧，找那种适合复杂模板的酶。
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2楼2011-11-28 13:42:37
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在雨中

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流经验哦 2011-11-28 17:57:23
popfirst(金币+5): 2011-12-17 00:45:06
而且，降落时PCR跟普通PCR跑出来的产物做DGGE，图谱没有差异，我比较过。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-11-28 14:37:02
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thestormcong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励应助 2011-11-28 22:50:41
popfirst(金币+3): 试一下 2011-11-29 00:42:07
我做的也是16sv3区的扩增，后来查看了一篇外文文献，参考了上面的方法，结果跑出来条带很单一，大小也一致。程序如下：95℃ 5min
    94℃ 30s     58℃ -53℃ 30s  72℃ 30s    10个循环
    94℃ 30s     53℃ 30s           72℃ 30s    25个循环
     72℃ 10min               这个程序没有问题。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-11-28 19:16:15
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