24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wx1119

铜虫 (小有名气)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 484.1
红花: 1
帖子: 282
在线: 39.7小时
虫号: 985054
注册: 2010-03-29
性别: MM
专业: 色谱分析

[求助] DGGE扩增问题

各位大侠，本人扩增DGGE V3区用的是B357-GC和B517，已经做了2个多月，但是一直扩增不出来片段，用不带GC夹的就能狗扩增出来！
PCR条件：95  10min
               93 30s
               52 45s
               72 1min
               30个循环
      72 5min
总基因组DNA是沼气发酵过程中的样品DNA

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

求助高手分析DGGE图谱，附PCR图和DGGE图谱已经有6人回复
DGGE胶回收问题已经有13人回复
DGGE上样孔很亮，DNA跑不下来已经有12人回复
求助DGGE染色问题已经有20人回复
【求助/交流】求PCR二次扩增引物已经有11人回复
【求助/交流】做DGGE，直接用带夹引物扩增不出来，怎么办？已经有10人回复
【求助/交流】DGGE遇到了难题，向大家求助！已经有10人回复
【求助/交流】DGGE中GC夹问题已经有9人回复
【求助/交流】土壤采样及DGGE问题已经有14人回复
【求助/交流】关于DGGE，求助已经有9人回复
【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事？？急！！！已经有36人回复

1楼 2011-11-04 16:37:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wx1119

铜虫 (小有名气)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 484.1
红花: 1
帖子: 282
在线: 39.7小时
虫号: 985054
注册: 2010-03-29
性别: MM
专业: 色谱分析

引用回帖:

7楼: Originally posted by yyz1001 at 2011-11-09 01:46:07:
LZ别着急，DGGE是需要不停地摸条件的~加油加油！
BSA我做细菌是不加的，真菌的时候加0.25。
不过我同意楼上童鞋的意见，你的预变性太长啦，5min足够啦~
话说你带GC夹PCR以后琼脂糖电泳有条带么？

DNA  1
357-GC 0.5
517       0.5
Taq       0.5
Buffer    5
DNTP    4
体系是50的
我的DNTP的浓度是2.5nM的，Taq酶是TAKALA的，和Buffer是一套的。