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目的片段与表达载体的连接
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1kb的目的片段与PET-19b连接,转化DH5a,平板培养16小时无菌落。做了空载体转化的对照,14小时平板菌落长得很好,也就是问题出在连接,怎么优化连接呢,有什么需要注意的? PS: 连接体系 14μl 目的片段,3μl 酶切载体,2μl buffer,1μl T4连接酶。(带有目的片段的T载体和PET载体都是用试剂盒提,使用相同的酶切体系) |
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笔冰河(金币+1): 2011-11-02 21:51:57
wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-11-04 13:00:29
笔冰河(金币+1): 2011-11-02 21:51:57
wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-11-04 13:00:29
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8楼2011-11-02 21:18:11
imyting
至尊木虫 (正式写手)
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- 专业: 生物大分子结构与功能

2楼2011-11-02 10:54:15
3楼2011-11-02 11:39:02
imyting
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4楼2011-11-02 11:49:24













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