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一曲清心

新虫 (初入文坛)


[交流] RNA胶图辩解

这是近期的提的小麦叶片总RNA,同一批次的材料,同时提取,为什么有的四条带,有的两条带?请高手指点!

RNA电泳图
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一曲清心

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
3楼: Originally posted by wiln1 at 2011-10-26 19:16:46:
第一次见这种情况,不过从图上看有4条带的样品的28s没有18s亮,应该是有降解,而后2个样品28s明显比18s亮质量要比前4个好。

总RNA的胶图每条带分别代表什么,有统一的定论吗?网上说的很杂。
7楼2011-10-31 16:42:19
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普通回帖

一曲清心(金币+2):谢谢参与
一曲清心(金币+2): 2011-10-31 16:38:21
拖尾图,可能有降解
2楼2011-10-26 12:43:13
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wiln1

金虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
一曲清心(金币+2):谢谢参与
jhu132llh(金币+3): good,感谢积极应助,很专业 2011-10-27 17:45:36
第一次见这种情况,不过从图上看有4条带的样品的28s没有18s亮,应该是有降解,而后2个样品28s明显比18s亮质量要比前4个好。
3楼2011-10-26 19:16:46
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zaitaxiang01

银虫 (小有名气)


★ ★
一曲清心(金币+2):谢谢参与
jhu132llh(金币+1): good,感谢积极应助 2011-10-27 17:46:24
马上得提RNA,过来学习。请问楼主你是用什么方法或者试剂盒提取的总RAN啊?
你接下来要做什么呢?
4楼2011-10-26 21:12:33
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wfw014

银虫 (小有名气)



一曲清心(金币+2):谢谢参与
我的问题和楼上的一样,期待回答中
5楼2011-10-26 22:32:16
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一曲清心

新虫 (初入文坛)


★ ★
jhu132llh(金币+2): good,感谢积极求助,很专业的问题.食肉猛禽类动物 2011-10-31 19:20:48
引用回帖:
2楼: Originally posted by jhu132llh at 2011-10-26 12:43:13:
拖尾图,可能有降解

我在网上了看了,包括试剂公司提供的图有的也是4个带或者更多。有四条带的是绿苗,两条带的是白化苗。
6楼2011-10-31 16:39:44
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一曲清心

新虫 (初入文坛)



jhu132llh(金币+1): 鼓励交流 2011-10-31 19:21:16
引用回帖:
4楼: Originally posted by zaitaxiang01 at 2011-10-26 21:12:33:
马上得提RNA,过来学习。请问楼主你是用什么方法或者试剂盒提取的总RAN啊?
你接下来要做什么呢?

就是用的天根的TRZIOL试剂,没用试剂盒。
8楼2011-10-31 16:45:52
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一曲清心

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
5楼: Originally posted by wfw014 at 2011-10-26 22:32:16:
我的问题和楼上的一样,期待回答中

同上,做实时荧光的,不影响做实验,就是不知道胶图什么情况。
9楼2011-10-31 16:47:17
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wiln1

金虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jhu132llh(金币+3): 鼓励交流 2011-10-31 19:21:35
引用回帖:
6楼: Originally posted by 一曲清心 at 2011-10-31 16:39:44:
我在网上了看了,包括试剂公司提供的图有的也是4个带或者更多。有四条带的是绿苗,两条带的是白化苗。

植物RNA电泳条带有两条,是两条最大的核糖体RNA(rRNA)分子,即28S(跑的最慢)和 18S(比28s快) rRNA。有时也可以看到三条带:28S 18S和5S。其实RNA电泳条带有多少也与物种和提取质量有关。但是只要18S 和28S rRNA带亮,且28S rRNA大约为18S rRNA 的两倍,说明提取的RNA没有发生降解,纯度好。
较小的RNA也很丰富但看不到,因为太小,跑出了凝胶的边界。多数细胞中的信使RNA(mRNA)经EB染色后不足以形成可见的带。

[ Last edited by wiln1 on 2011-10-31 at 19:25 ]
10楼2011-10-31 19:09:03
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一曲清心

新虫 (初入文坛)


★ ★
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极交流 2011-11-03 11:55:28
引用回帖:
10楼: Originally posted by wiln1 at 2011-10-31 19:09:03:
植物RNA电泳条带有两条,是两条最大的核糖体RNA(rRNA)分子,即28S(跑的最慢)和 18S(比28s快) rRNA。有时也可以看到三条带:28S 18S和5S。其实RNA电泳条带有多少也与物种和提取质量有关。但是只要18S  ...

解答很详细。我这六个样是同一批次的,样品是白苗和绿苗的区别。刚好在RNA上有差别,所以好奇:是不是白苗就是缺那两个小带?之前提的时候也是白苗两个带,绿苗四个带。
11楼2011-11-01 16:33:16
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wiln1

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
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jhu132llh(金币+2): 鼓励积极交流 2011-11-03 11:55:45
有可能吧,因为我也不是做这方面的,所以不是很清楚。我看过别人提起的RNA电泳图,有2条带的,也有3和5条的。
12楼2011-11-01 18:27:36
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wfw014

银虫 (小有名气)



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引用回帖:
8楼: Originally posted by 一曲清心 at 2011-10-31 16:45:52:
就是用的天根的TRZIOL试剂,没用试剂盒。

可以将你提总RNA的详细方法给我发一下吗,谢谢。
我的邮箱wfw_014@163.com
13楼2011-11-02 11:44:24
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dream-fish

银虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jhu132llh(金币+2): good,感谢积极应助 2011-11-05 09:46:32
这个还是正常的,如果你用专门跑RNA的胶,你可能会看到5条带。
14楼2011-11-03 12:58:35
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一曲清心

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
13楼: Originally posted by wfw014 at 2011-11-02 11:44:24:
可以将你提总RNA的详细方法给我发一下吗,谢谢。
我的邮箱wfw_014@163.com

注意查收
15楼2011-11-08 09:07:00
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wfw014

银虫 (小有名气)



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引用回帖:
15楼: Originally posted by 一曲清心 at 2011-11-08 09:07:00:
注意查收

我已经收到,万分感谢
16楼2011-11-10 15:18:42
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suijinkai

木虫 (小有名气)


★ ★ ★
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jhu132llh(金币+2): good,鼓励热心虫友积极参与讨论 2011-11-12 10:41:56
这个据说是有叶绿体的RNA,才导致的其它条带,我没有文献和可靠资料,如果想进一步搞清楚,建议楼主查查相关文献。
17楼2011-11-11 14:02:20
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A406

新虫 (初入文坛)


赞同16楼的观点
18楼2011-11-14 22:16:22
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jla_802388

银虫 (正式写手)



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做实时荧光的,不影响做实验,就是不知道胶图什么情况。
19楼2011-11-16 12:53:54
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