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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 阳性菌破壁问题求指导
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塞外雨

金虫 (著名写手)

[交流] 阳性菌破壁问题求指导

0.3g菌体，加入3ml的PBS或者裂解液，380W，超9.9s，停9.9s，20min，12000转离心1-2min还能得到菌体沉淀，延长超声时间也白搭，求指点。
谢谢

[ Last edited by 塞外雨 on 2011-10-25 at 16:32 ]
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1楼 2011-10-25 14:54:27
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jiegou2006

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
菌体超声破碎、高速离心后肯定都有沉淀的，沉淀可能是完整细胞，也可能是破碎后的细胞碎片、变性蛋白、多糖等物质，因此你是怎么判断得到的沉淀就是没有破碎的菌体呢？先把这个问题搞清楚吧。
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10楼2011-10-27 09:18:31
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
塞外雨(金币+1): 谢谢，还有更好的方法吗？ 2011-10-26 10:41:43
wanhscn(金币+2): 鼓励回答更多问题，有奖励! 2011-10-26 11:13:49
引用回帖:
1楼: Originally posted by 塞外雨 at 2011-10-25 07:54:27:
0.3g菌体，加入3ml的PBS或者裂解液，380W，超9.9s，停9.9s，20min，12000转离心1-2min还能得到菌体沉淀，延长超声时间也白搭，求指点。
谢谢
[ Last edited by 塞外雨 on 2011-10-25 at 16:32 ]

酶法裂解呢？试试溶菌酶吧
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-10-26 10:23:05
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塞外雨

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝月望宁 at 2011-10-26 10:23:05:
酶法裂解呢？试试溶菌酶吧

谢谢，溶菌酶对所有菌体破壁都有作用吗？
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3楼2011-10-26 10:43:21
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海王之心2751

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你不说清楚 谁帮你解答 ，目的产物都没说那些试剂或物理方面会被破坏 。如果无所谓的话，可用酸，丙酮，液氮，高速细胞破碎器。。。。。。。。。。
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4楼2011-10-26 19:49:29
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