应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE 蛋白胶跑胶问题
281/3返回列表123下一页
查看: 6229  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

孟王氏

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE 蛋白胶跑胶问题

很纠结，最近跑蛋白胶，我的都是这个样子，别人的都没有问题，我的发酵液中有金属离子，可能有较多残留，会不会是这个问题，应该怎么解决呢?谢谢啊～～～

好纠结，上面半块胶什么都没有



这个maker还好，别的就不行。maker左边的是别人的蛋白。。右边是我的蛋白
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生物实验相关链接

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-25 00:29:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shenxing325

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+2): Good！ 2011-10-28 17:57:42
wanhscn(金币+2): 鼓励新虫发帖！ 2011-10-28 17:57:55
根据你第一个图来看，你这个上半部分完全没有把蛋白质分子截留住，所以你这个胶的浓度肯定是不均匀的，配胶是不是有问题。另外，其实电压浓缩胶80v，分离胶120v就够了，浓缩胶可以再长一点，记得要压成一条直线喔~时间长一点没关系的。还有，你的缓冲溶液的pH是不是有问题，那个影响也会很大的。不知道能不能帮到你
赞一下(4人) 回复此楼
19楼2011-10-28 17:10:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

孟王氏

金虫 (小有名气)
自己先顶一下～～希望大家帮忙啊～～～
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-25 00:30:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jakelly

金虫 (著名写手)

小小科学家

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-10-25 11:02:13
孟王氏(金币+10): 给的建议很好，我的就是凝胶的问题，Ap过期导致的谢谢你 2011-10-25 23:46:33
出现这种现象有可能是凝胶的质量不过关，凝胶时间不致导致凝胶内部浓度不均匀，条带跑歪；还有一种可能是电压过高，受热使条带变形，考虑电泳时放入冰浴降温，或调低电压；还有就是可能是上样的样品问题，就是你说提到的。
如果还有其它问题，可以进一步交流，我们实验室几乎天天做western.
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

孟王氏
爱人的人爱的我
3楼2011-10-25 01:29:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
西瓜(金币+1): 好久不见 2011-10-25 17:53:27
是marker（标记）而不是maker（制造者）

你的标记出来了5条，原本是多少条？
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-10-25 06:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianshu0803

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 加样前注意看一下胶的底部，尽量不要有气泡，气泡也会影响胶两头的电压：Good！ 2011-10-25 11:01:53
孟王氏(金币+5): 谢谢你的帮助，我的问题解决了，主要原因还是胶的浓度不均匀，电压也有点偏高 2011-10-25 23:48:04
1：胶的浓度不均匀  2：电压过高 一般150伏就很高了  3：加样前注意看一下胶的底部，尽量不要有气泡，气泡也会影响胶两头的电压  4：跑之前，要仔细清洗一下实验器材，保证两个电极铁丝上没有杂物。
呵呵，做实验小心点总是没有错的。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

孟王氏
5楼2011-10-25 09:31:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孟王氏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jakelly at 2011-10-25 01:29:18:
出现这种现象有可能是凝胶的质量不过关，凝胶时间不致导致凝胶内部浓度不均匀，条带跑歪；还有一种可能是电压过高，受热使条带变形，考虑电泳时放入冰浴降温，或调低电压；还有就是可能是上样的样品问题，就是你说 ...

调低电压用150V跑到底依然出现这个情况啊。。那如果是样品问题的话，应该怎么解决呢？
赞一下 回复此楼
6楼2011-10-25 13:03:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孟王氏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-10-25 06:21:20:
是marker（标记）而不是maker（制造者）

你的标记出来了5条，原本是多少条？

原本是7条，但是我们一般也就能跑出来5条
赞一下 回复此楼
7楼2011-10-25 13:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孟王氏

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by tianshu0803 at 2011-10-25 09:31:12:
1：胶的浓度不均匀  2：电压过高 一般150伏就很高了  3：加样前注意看一下胶的底部，尽量不要有气泡，气泡也会影响胶两头的电压  4：跑之前，要仔细清洗一下实验器材，保证两个电极铁丝上没有杂物。
呵呵，做实 ...

胶的底部气泡赶不出来啊？而且之前跑胶也没有注意过这个问题，跑的也还好。。谢谢啊
赞一下 回复此楼
8楼2011-10-25 13:09:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孟王氏

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by jakelly at 2011-10-25 01:29:18:
出现这种现象有可能是凝胶的质量不过关，凝胶时间不致导致凝胶内部浓度不均匀，条带跑歪；还有一种可能是电压过高，受热使条带变形，考虑电泳时放入冰浴降温，或调低电压；还有就是可能是上样的样品问题，就是你说 ...

对了，我也用冰浴降温做过一次，得到结果跟这个差不多啊。。
赞一下 回复此楼
9楼2011-10-25 13:11:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlazs

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该就是制备的胶不行，浓度不均匀
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

孟王氏
10楼2011-10-25 14:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 孟王氏 的主题更新
281/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭