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孟王氏

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE 蛋白胶跑胶问题

很纠结,最近跑蛋白胶,我的都是这个样子,别人的都没有问题,我的发酵液中有金属离子,可能有较多残留,会不会是这个问题,应该怎么解决呢?谢谢啊~~~

好纠结,上面半块胶什么都没有



这个maker还好,别的就不行。maker左边的是别人的蛋白。。右边是我的蛋白
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jakelly

金虫 (著名写手)

小小科学家

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-10-25 11:02:13
孟王氏(金币+10): 给的建议很好,我的就是凝胶的问题,Ap过期导致的谢谢你 2011-10-25 23:46:33
出现这种现象有可能是凝胶的质量不过关,凝胶时间不致导致凝胶内部浓度不均匀,条带跑歪;还有一种可能是电压过高,受热使条带变形,考虑电泳时放入冰浴降温,或调低电压;还有就是可能是上样的样品问题,就是你说提到的。
如果还有其它问题,可以进一步交流,我们实验室几乎天天做western.

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爱人的人爱的我
3楼2011-10-25 01:29:18
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查看全部 28 个回答

孟王氏

金虫 (小有名气)

自己先顶一下~~希望大家帮忙啊~~~
2楼2011-10-25 00:30:02
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


西瓜(金币+1): 好久不见 2011-10-25 17:53:27
是marker(标记)而不是maker(制造者)

你的标记出来了5条,原本是多少条?
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-10-25 06:21:20
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tianshu0803

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 加样前注意看一下胶的底部,尽量不要有气泡,气泡也会影响胶两头的电压:Good! 2011-10-25 11:01:53
孟王氏(金币+5): 谢谢你的帮助,我的问题解决了,主要原因还是胶的浓度不均匀,电压也有点偏高 2011-10-25 23:48:04
1:胶的浓度不均匀  2:电压过高 一般150伏就很高了  3:加样前注意看一下胶的底部,尽量不要有气泡,气泡也会影响胶两头的电压  4:跑之前,要仔细清洗一下实验器材,保证两个电极铁丝上没有杂物。
呵呵,做实验小心点总是没有错的。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2011-10-25 09:31:12
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