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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE 蛋白胶跑胶问题
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 是啊~ 2011-10-25 17:54:20
本帖仅楼主可见
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11楼2011-10-25 16:34:29
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孟王氏

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by mlazs at 2011-10-25 14:21:20:
应该就是制备的胶不行，浓度不均匀

恩估计有可能，我重新买了Ap在试呢。。在想是不是AP不行，导致的
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12楼2011-10-25 20:29:00
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孟王氏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by mengfei8336 at 2011-10-25 16:34:29:
蛋白胶的质量很重要的，其他的影响都不大，建议楼主再好好练习下做胶的技术，不要急于求成，从你的图来看明显就是胶没做好。

哦。。。
13楼2011-10-25 20:34:41
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loganfan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-26 11:27:56
看样子使胶的问题，和样品本身关系不是很大，建议好好灌个胶试试，样品最多再做个透析处理吧，样品浓度各方面都很合适
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14楼2011-10-25 21:00:08
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
把配方和做法，具体到每一个参数，发上来。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
15楼2011-10-25 23:46:49
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bingdong05

银虫 (正式写手)
若是胶的质量没有问题的话，先用80伏电压，半个小时后用120伏的电压试试
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16楼2011-10-26 11:48:02
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lingorling

铁虫 (小有名气)
应该是胶 的问题吧，我也做过，但是不多，从楼主的问题中长了很多见识
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

孟王氏
17楼2011-10-26 17:23:16
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孟王氏

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
17楼: Originally posted by lingorling at 2011-10-26 17:23:16:
应该是胶 的问题吧，我也做过，但是不多，从楼主的问题中长了很多见识

呵呵是胶的问题，我已经搞定了呵呵
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18楼2011-10-28 16:21:44
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shenxing325

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+2): Good！ 2011-10-28 17:57:42
wanhscn(金币+2): 鼓励新虫发帖！ 2011-10-28 17:57:55
根据你第一个图来看，你这个上半部分完全没有把蛋白质分子截留住，所以你这个胶的浓度肯定是不均匀的，配胶是不是有问题。另外，其实电压浓缩胶80v，分离胶120v就够了，浓缩胶可以再长一点，记得要压成一条直线喔~时间长一点没关系的。还有，你的缓冲溶液的pH是不是有问题，那个影响也会很大的。不知道能不能帮到你
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19楼2011-10-28 17:10:17
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孟王氏

金虫 (小有名气)
西瓜: 回帖置顶 2012-05-31 09:36:29
引用回帖:
19楼: Originally posted by shenxing325 at 2011-10-28 17:10:17:
根据你第一个图来看，你这个上半部分完全没有把蛋白质分子截留住，所以你这个胶的浓度肯定是不均匀的，配胶是不是有问题。另外，其实电压浓缩胶80v，分离胶120v就够了，浓缩胶可以再长一点，记得要压成一条直线喔 ...

谢谢你啊，你的分析很到位，我的问题已经解决了，就是胶不够均匀，有个试剂有点过期了
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20楼2011-10-29 11:05:53
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