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SDS-PAGE 蛋白胶跑胶问题
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孟王氏
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专业: 生物化学
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SDS-PAGE 蛋白胶跑胶问题
很纠结,最近跑蛋白胶,我的都是这个样子,别人的都没有问题,我的发酵液中有金属离子,可能有较多残留,会不会是这个问题,应该怎么解决呢?谢谢啊~~~
好纠结,上面半块胶什么都没有
这个maker还好,别的就不行。maker左边的是别人的蛋白。。右边是我的蛋白
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1楼
2011-10-25 00:29:29
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shenxing325
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专业: 生物大分子结构与功能
★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+2): Good! 2011-10-28 17:57:42
wanhscn(金币+2): 鼓励新虫发帖! 2011-10-28 17:57:55
根据你第一个图来看,你这个上半部分完全没有把蛋白质分子截留住,所以你这个胶的浓度肯定是不均匀的,配胶是不是有问题。另外,其实电压浓缩胶80v,分离胶120v就够了,浓缩胶可以再长一点,记得要压成一条直线喔~时间长一点没关系的。还有,你的缓冲溶液的pH是不是有问题,那个影响也会很大的。不知道能不能帮到你
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19楼
2011-10-28 17:10:17
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孟王氏
金虫
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虫号: 858627
注册: 2009-09-28
专业: 生物化学
自己先顶一下~~希望大家帮忙啊~~~
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2楼
2011-10-25 00:30:02
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jakelly
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-10-25 11:02:13
孟王氏(金币+10): 给的建议很好,我的就是凝胶的问题,Ap过期导致的谢谢你 2011-10-25 23:46:33
出现这种现象有可能是凝胶的质量不过关,凝胶时间不致导致凝胶内部浓度不均匀,条带跑歪;还有一种可能是电压过高,受热使条带变形,考虑电泳时放入冰浴降温,或调低电压;还有就是可能是上样的样品问题,就是你说提到的。
如果还有其它问题,可以进一步交流,我们实验室几乎天天做western.
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孟王氏
爱人的人爱的我
3楼
2011-10-25 01:29:18
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西瓜(金币+1): 好久不见 2011-10-25 17:53:27
是marker(标记)而不是maker(制造者)
你的标记出来了5条,原本是多少条?
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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼
2011-10-25 06:21:20
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