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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 看不见酶切后的小片段
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 看不见酶切后的小片段 已有10人参与

我的载体大约15kb，酶切后本应该从载体上切下来一个约500bp的片段，但是酶切后跑胶只看得到大片段，看不到小片段，虫友们也会遇到这样的问题吗
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sfb1020

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1楼 2011-10-24 16:49:10
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gydgs033

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
胶的浓度估计得调整
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2楼2011-10-24 17:03:08
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豆豆鱼

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+2): 感谢交流！ 2011-10-24 21:22:51
你确定酶切开了吗？
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3楼2011-10-24 19:58:38
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+2): 鼓励交流！ 2011-10-24 21:23:07
估计是看不见的，载体与小片段的亮度比在30:1呢
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人生百态原为海，看破红尘方为岸！
4楼2011-10-24 21:00:43
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章信来

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+2): 欢迎发帖交流 2011-10-26 18:26:03
同意三楼，因为单位产度上嵌合的染料基本上市恒定的，所以片段亮度是和产度成正比的。但也要考虑胶浓度和电泳时间，浓度过低或时间过长，都会使小片段变淡。
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5楼2011-10-25 07:32:01
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+3): 跑胶时间的建议很好，质粒多了有可能切不完全 2011-10-26 18:26:36
质粒加多点，同时跑胶时间缩短
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低调务实！
6楼2011-10-25 08:42:52
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sfb1020

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
就是那样的，目的片段小的就是很淡，你可以多酶切点
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7楼2011-10-25 11:10:22
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20002504

至尊木虫 (知名作家)

文紋虫！
★ ★ ★
silicare(金币+3, BioEPI+1): 正解 2011-10-26 18:27:02
引用回帖:
6楼: Originally posted by 更深的蓝 at 2011-10-25 08:42:52:
质粒加多点，同时跑胶时间缩短

重要的是考虑胶浓度和电泳时间，浓度过低或时间过长，都会使小片段变淡。
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走一条有历史痕迹的道路，也许才有“痕”！
8楼2011-10-25 12:19:38
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花花贝

金虫 (知名作家)
我140bp都看得见
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9楼2011-10-26 16:06:36
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 花花贝 at 2011-10-26 16:06:36:
我140bp都看得见

那你上了多少样呢，质粒多大？
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10楼2011-10-27 10:38:18
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