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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 看不见酶切后的小片段已有10人参与

我的载体大约15kb,酶切后本应该从载体上切下来一个约500bp的片段,但是酶切后跑胶只看得到大片段,看不到小片段,虫友们也会遇到这样的问题吗
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gydgs033

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
胶的浓度估计得调整
2楼2011-10-24 17:03:08
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豆豆鱼

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 感谢交流! 2011-10-24 21:22:51
你确定酶切开了吗?
3楼2011-10-24 19:58:38
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 鼓励交流! 2011-10-24 21:23:07
估计是看不见的,载体与小片段的亮度比在30:1呢
人生百态原为海,看破红尘方为岸!
4楼2011-10-24 21:00:43
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章信来

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+2): 欢迎发帖交流 2011-10-26 18:26:03
同意三楼,因为单位产度上嵌合的染料基本上市恒定的,所以片段亮度是和产度成正比的。但也要考虑胶浓度和电泳时间,浓度过低或时间过长,都会使小片段变淡。
5楼2011-10-25 07:32:01
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更深的蓝

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+3): 跑胶时间的建议很好,质粒多了有可能切不完全 2011-10-26 18:26:36
质粒加多点,同时跑胶时间缩短
低调务实!
6楼2011-10-25 08:42:52
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sfb1020

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
就是那样的,目的片段小的就是很淡,你可以多酶切点
7楼2011-10-25 11:10:22
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20002504

至尊木虫 (知名作家)

文紋虫!

★ ★ ★
silicare(金币+3, BioEPI+1): 正解 2011-10-26 18:27:02
引用回帖:
6楼: Originally posted by 更深的蓝 at 2011-10-25 08:42:52:
质粒加多点,同时跑胶时间缩短

重要的是考虑胶浓度和电泳时间,浓度过低或时间过长,都会使小片段变淡。
走一条有历史痕迹的道路,也许才有“痕”!
8楼2011-10-25 12:19:38
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花花贝

金虫 (知名作家)

我140bp都看得见
要知道在这枯燥的读书生活之外是一个精彩的世界.
9楼2011-10-26 16:06:36
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 花花贝 at 2011-10-26 16:06:36:
我140bp都看得见

那你上了多少样呢,质粒多大?
10楼2011-10-27 10:38:18
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