| 查看: 1438 | 回复: 4 | ||
[求助]
酶切片段大小不稳定
|
大家好，我在做微卫星标记的开发，用Sau 3AI内切酶酶切基因组DNA，回收250-1000bp的片段，寡核苷酸链 A( 5'- GATCGTCGACGGTACCGAATTCT- 3') 和 寡 核 苷 酸 链 B ( 5'- GTCAAGAATTCGGTACCGTCGAC- 3') 合 成 Brown 接头。在连接酶作用下连接接头，16°过夜，用寡 核 苷 酸 链 B 作为引物 PCR预扩增时，电泳检测片段范围为250-2000（2000多的也有），重复了好几次，都是这样，而且二次PCR电泳也是这种情况，不知道是什么原因，请大家多指教，谢谢！图片见附件！ 基因组酶切  一次PCR电泳  二次PCR电泳 |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有272人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 质粒单酶切出现两条带
已经有18人回复
- 我用的是pMAL-m2载体，片段大小连不上！
已经有3人回复
- 【求助/交流】单酶切酶和DNA的比例，体系大小的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】BamHI酶切
已经有27人回复
- 【求助/交流】质粒片段丢失问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？
已经有18人回复
- 【求助/交流】关于酶切问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】4kb片段的连接
已经有14人回复
- 求双酶切，分步酶切的具体操作步骤
已经有7人回复
 |
2楼2012-03-21 16:50:55
3楼2012-03-21 17:28:14
xuchenxi121
新虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 134.1
- 帖子: 32
- 在线: 8.2小时
- 虫号: 1062624
- 注册: 2010-07-22
- 性别: MM
- 专业: 蔬菜学与瓜果学
4楼2012-03-30 18:05:25
ZOEY21
金虫 (小有名气)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2617.3
- 散金: 41
- 红花: 6
- 帖子: 219
- 在线: 208.6小时
- 虫号: 826767
- 注册: 2009-08-12
- 专业: 生态学
5楼2012-06-26 15:15:39
