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pumpkin236

铁虫 (小有名气)

[求助] RT-PCR 溶解曲线出现双峰

常坐RT-PCR的同仁,能帮我看下,我这个情况么。我是提RNA-CDNA合成-RT-PCR。word里是我copy的我的目的基因的溶解曲线和不加CDNA,只加目的基因引物的溶解曲线。不加CDNA,只加目的基因引物的溶解曲线 会出现双峰,但是目的基因的没有双峰。不知道是不是有二聚物形成,这样是不数据就不可信了啊?
还有一个问题就是一般扩增的CT值是多少?二楼还有补充

[ Last edited by 1949stone on 2011-10-21 at 14:47 ]
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pumpkin236

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by pumpkin236 at 2011-10-21 09:49:46:
常坐RT-PCR的同仁,能帮我看下,我这个情况么。我是提RNA-CDNA合成-RT-PCR。word里是我copy的我的目的基因的溶解曲线和不加CDNA,只加目的基因引物的溶解曲线。不加CDNA,只加目的基因引物的溶解曲线 会出现双峰, ...

补充上,一楼那个附件中图的顺序反了,是只加引物的空白出现了双峰,双峰一个峰在78,一个在85.而目的基因中的峰是85.求各位大侠帮我看下
3楼2011-10-21 10:16:15
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小婧子zj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-10-21 14:47:26
一般杂峰出现在目的峰之前是杂质峰,出现在之后好像是二聚物,这是我在当时培训上学的,其实我建议你去你们那个仪器的技术员那里咨询,他们的作用很大呀
2楼2011-10-21 10:01:11
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