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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RT-PCR 溶解曲线出现双峰
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pumpkin236

铁虫 (小有名气)

[求助] RT-PCR 溶解曲线出现双峰

常坐RT-PCR的同仁，能帮我看下，我这个情况么。我是提RNA-CDNA合成-RT-PCR。word里是我copy的我的目的基因的溶解曲线和不加CDNA，只加目的基因引物的溶解曲线。不加CDNA，只加目的基因引物的溶解曲线 会出现双峰，但是目的基因的没有双峰。不知道是不是有二聚物形成，这样是不数据就不可信了啊？
还有一个问题就是一般扩增的CT值是多少？二楼还有补充

[ Last edited by 1949stone on 2011-10-21 at 14:47 ]
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1楼 2011-10-21 09:49:46
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小婧子zj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-10-21 14:47:26
一般杂峰出现在目的峰之前是杂质峰，出现在之后好像是二聚物，这是我在当时培训上学的，其实我建议你去你们那个仪器的技术员那里咨询，他们的作用很大呀
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2楼2011-10-21 10:01:11
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pumpkin236

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by pumpkin236 at 2011-10-21 09:49:46:
常坐RT-PCR的同仁，能帮我看下，我这个情况么。我是提RNA-CDNA合成-RT-PCR。word里是我copy的我的目的基因的溶解曲线和不加CDNA，只加目的基因引物的溶解曲线。不加CDNA，只加目的基因引物的溶解曲线 会出现双峰， ...

补充上，一楼那个附件中图的顺序反了，是只加引物的空白出现了双峰，双峰一个峰在78，一个在85.而目的基因中的峰是85.求各位大侠帮我看下
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3楼2011-10-21 10:16:15
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