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tanxi125

银虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 265.2
红花: 1
帖子: 86
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虫号: 1177358
注册: 2010-12-25
性别: MM
专业: 生物化学

[求助] 3301质粒用EcoI 和HandⅢ 无法酶切

3301质粒用EcoI 和HandⅢ 无法酶切
用的是两个酶的通用buffer  R
  体系是20μl 体系

ddH2O          12μl
10×buffer R 2μl
质粒          4μl
EcoI                   1μl
HandⅢ    1μl
37℃过夜

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什么都得靠自己！我现在深刻理解！

1楼2011-10-17 21:12:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)

BioEPI: 1
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虫号: 79445
注册: 2005-07-10
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励交流，欢迎常来 2011-10-18 16:30:57

引用回帖:

3楼: Originally posted by tanxi125 at 2011-10-18 12:03:05:
时间长难道不就酶切的更加完全吗

时间长当然能酶切的更加完全，关键是你时间太长，有可能全部切烂了，提出的问题没说是切不开还是其它状况，但这么长的时间肯定是有问题的，另外，如果你用双酶切质粒切不开，那你可以分别试一下单切效果，按理说这两个酶双切用通用buffer很好切才对的呀，我们常用，效果不错的呀，，，如果你单切不开，那可能就是酶有问题了，可考虑换支新酶试试