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求助-TGGE和DGGE的电泳图谱
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TGGE和DGGE的电泳图谱，最好有详细解释，举例图就可以，最后是混合菌跑出来的电泳图，本人不是学分子生物的，不太懂，看了半天了都不懂，急用呀，谢谢亲爱的虫虫们了。 [ Last edited by 1949stone on 2011-10-9 at 10:02 ] |
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 【分子生物】EPI帖 |
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4楼2011-10-09 21:13:26
红多多
木虫 (正式写手)
版筑饭牛的日子
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【答案】应助回帖
1949stone(MolEPI+1): 很好 很活跃啊 2011-10-09 10:03:13
weiranran(金币+10): 满意，谢谢，呵呵。。。 2011-10-09 21:10:35
weiranran(金币+10): 满意，谢谢，呵呵。。。 2011-10-09 21:10:35
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TGGE和DGGE都是能区分分子大小相同，但是碱基序列不同的实验手段。其原理就是能使双链DNA在电泳的过程中局部变性，由于各种DNA序列不一致，在同一温度解链程度是不一样的这样的。由于解链情况不一样，在聚丙烯酰胺胶里面的泳动速度也不一样，从而可以区分开碱基对数相同但是序列不同的DNA，当然这个也可以做RNA，就是对胶和温度梯度的要求要稍微高点。 tgge是指温度梯度电泳。就是说你电泳过程中胶板各个区域温度是不一样的，这种电泳分为水平和垂直电泳两种，水平的指电泳方向和温度梯度方向一致的，垂直的就是两者方向是垂直的。 先说说水平的，由于方向是一致的电泳出来的图形就是这中情况（图一）原因就是在电泳初期，由于DNA双链分子核苷酸数量是一样的，开始只有一条带（当然这个时候你看不到，因为没有染色）然后在经过不同温度梯度的时候DNA发生温度导致的局部解链，形态发生变化，从而改变泳动速度，不同的DNA分子由于核苷酸组成和分布不一样，其解链程度不同，从而得出图一这种结果。 垂直电泳，电泳初期，点样孔跨越各个温度梯度，所以一开始每个种DNA分子都处于不同的温度区间，如果温度从左到右增加，那么图片中最左边的条带就是略有变性，然后中间有一个上升状的就是DNA解链从初级到完全解链的温度区间，最右边条带就是完全解链后条带电泳出来的结果。 一般做一组TGGE是先用垂直电泳摸清楚变性区间的大致情况，然后用水平电泳来做出最终结果图。 DGGE和TGGE原理大致相同，只不在胶板中不是温度使DNA变性而是加入不同浓度的变性计使DNA变性，原理都是一样的。 希望这对你有帮助  图一  图二 |
2楼2011-10-09 09:52:15
红多多
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西瓜(金币+2): 热心！最近很给力！ 2011-10-10 17:13:45
西瓜(金币+2): 热心！最近很给力！ 2011-10-10 17:13:45
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http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3670729&pid=2297628&page=2#pid2297628 我在上面传了个实验手册 你也可以看看 嘿嘿 |
3楼2011-10-09 10:23:45
