应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助—连上质粒的片段切不下来
141/2返回列表12下一页
查看: 2332  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

吴德光

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

吴德光

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-25 17:05:48
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-09-25 20:59:10
我去 这个问题我也遇到过  菌落PCR鉴定是阳性 质粒抽出来大小也对 可就是酶切切不开  郁闷的我 后来不得已又重新连的给连好的
赞一下(1人) 回复此楼
冷风过心变热
2楼2011-09-25 18:33:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aayqaa

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励应助。 2011-09-25 20:59:27
看不到不一定是没切下来，测序正确的话应该没问题，一般切下来的条带会很淡，可以试试在电泳时多加点样，有时候是需要用意念来看到的，呵呵
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-09-25 19:19:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

目的片段如果太小就可能不明显
赞一下 回复此楼
4楼2011-09-25 20:02:18
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-09-25 20:59:38
用眼睛的余光看 不要集中注意力正面看
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-09-25 20:03:27
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aayqaa at 2011-09-25 19:19:44:
看不到不一定是没切下来，测序正确的话应该没问题，一般切下来的条带会很淡，可以试试在电泳时多加点样，有时候是需要用意念来看到的，呵呵

测序都正确 无论加样多少都不行  就是切不开 换了新的酶也不行  可是重新连的一切就开
赞一下 回复此楼
冷风过心变热
6楼2011-09-26 08:31:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

有可能酶切位点的地方有碱基突变了。
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
7楼2011-09-26 10:53:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子菜鸟

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): good！很活跃啊！ 2011-09-27 14:16:49
吴德光(金币+4): 谢谢，您的分析很好，我试试，我连的片段有两个300左右，还有一个1600 2011-10-07 22:49:15
酶是不是有问题？用两种酶分别做次单酶切，点个质粒作对照看看这两个酶是不是有问题。buffer也检查一下……连接的片段有多大？
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-09-27 10:37:00
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原韬

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

单酶双切有时候会有这样的问题，选择一下加入另一种酶做个双酶双切，看看能不能切出特异条带
赞一下 回复此楼
9楼2011-09-29 09:55:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

临风7071

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): good 2011-09-29 18:44:39
最有可能的是你选的酶切位点在大肠杆菌中被甲基化了，识别不了。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-09-29 11:43:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 吴德光 的主题更新
141/2返回列表12下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 16:25 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:12 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:00 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:57 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:01 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 12:35 by 40ms4Wlo4umh
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:11 by 23jxep3nCNZb
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 10:01 by 23jxep3nCNZb
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭