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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 奇怪的电泳图，求高手解释！！
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dhmdddd

木虫 (正式写手)

[求助] 奇怪的电泳图，求高手解释！！

额，以前没有遇到过这样子的情况，电泳图是质粒酶切图。上午提取这个质粒（和跑胶这个是相同质粒，但是不同的宿主），跑胶之后发现亮度可以，EcoRI单切后也是同样的情况，那个胶没有拍照……上传的这个电泳图是一样的质粒，EcoRI和HindIII双切，结果，结果就是这个样子……话说前边两次用错了buffer，切的效果还挺好……宝公司的酶，求解释啊，求高手给个解释！！先谢过！！
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上班族，学习ing……
1楼 2011-09-13 20:46:04
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
我感觉是切没了！
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真相是最大的奢侈品
2楼2011-09-13 21:57:32
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dhmdddd

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-13 21:57:32:
我感觉是切没了！

怎么会切没了呢？切了三个多小时，时间不算很长吧……
还有，上次我也是切这个质粒，也是EcoRI单切，结果很好……
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上班族，学习ing……
3楼2011-09-13 22:17:39
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dhmdddd

木虫 (正式写手)
忘记说了，我是50μ的体系，切了三个多小时！
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上班族，学习ing……
4楼2011-09-14 14:20:50
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dhmdddd

木虫 (正式写手)
这个问题到最后也没有找到到底是怎么切没有了，好像是试剂盒的问题，新换的试剂盒，最后师兄做酶切的时候也遇到了相同的问题，换了试剂盒之后就没有这种现象了……总之，有时候分子还是很难解释的……
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上班族，学习ing……
5楼2011-10-13 15:25:54
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luoyang87

新虫 (初入文坛)
切之前的呢？
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dhmdddd
6楼2011-10-14 13:42:39
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

dhmdddd(金币+1): 酶切体系如下：质粒30μ，水11μ，bufer，5μ，宝公司双酶各2μ，这个体系有问题吗？酶是刚刚开的新酶，应该没有问题 2011-10-14 19:01:23
这个肯定是酶及反应休系的问题
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7楼2011-10-14 15:49:13
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

dhmdddd(金币+1): 质粒提取的很亮，跑胶时候没有点质粒 2011-10-14 19:04:32
怎么没有未酶切的质粒？？怀疑你的质粒抽提质量很差
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8楼2011-10-14 16:54:56
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dhmdddd

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by luoyang87 at 2011-10-14 13:42:39:
切之前的呢？

切之前质粒亮度很好，一般来说我们看亮度可以了就直接切了……
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上班族，学习ing……
9楼2011-10-14 19:05:45
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adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-10-14 22:03:37
dhmdddd(金币+1): 谢谢~ 2011-10-16 02:04:31
酶是不是污染了，这个明显是切弥散掉了。我做基因组酶切最后就要这种图。
换一支酶试试~
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10楼2011-10-14 19:31:12
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