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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 奇怪的电泳图
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jlh02051118

银虫 (小有名气)

[求助] 奇怪的电泳图

目的带和Marker都出现了拖尾和皱褶。电泳液新换用的是1%的胶，颗粒完全融化，电压70V，染料用的是Gelgreen的。以前在老所跑电泳没出现过这种现象，搬到新所后把EB换了后就出现这种现象，难道是染料的事？
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1楼 2011-09-23 18:55:47
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athenawj

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

jlh02051118(金币+1): 谢谢，打算再耐心做一次 2011-09-24 13:25:58
引用回帖:
1楼: Originally posted by jlh02051118 at 2011-09-23 18:55:47:
目的带和Marker都出现了拖尾和皱褶。电泳液新换用的是1%的胶，颗粒完全融化，电压70V，染料用的是Gelgreen的。以前在老所跑电泳没出现过这种现象，搬到新所后把EB换了后就出现这种现象，难道是染料的事？
[eimg]3 ...

难道是凝胶没凝好？
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2楼2011-09-24 10:15:52
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死
我觉得是缓冲液
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不让吃就去死
3楼2011-09-24 23:35:15
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healerly

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2011-09-24 23:37:34
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死
离子浓度不够
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不让吃就去死
5楼2011-09-24 23:42:21
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q1009501313

铜虫 (小有名气)
★
dhd997(金币+1): 直觉？ 2011-09-25 09:12:35
第六条最能说明问题、也许会有意想不到结果
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6楼2011-09-25 08:21:39
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蓝慧

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+3): Good!鼓励交流，待楼主反馈信息后再授予专家指数一枚！ 2011-09-25 16:35:49
wanhscn(金币+1): 欢迎常来分子生物版！ 2011-09-25 16:36:31
wanhscn(金币+3, MolEPI+1): 根据版规，经讨论决定破格授予阁下一枚专家指数！祝国庆快乐！ 2011-10-03 11:17:47
1、PCR产物自身原因：

往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产物 过多。

对策：①减少Taq酶的量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓度。④增加模板量，减少引物的用量 ，减少循环次数，提高退火温度。

2、电泳体系的问题：

（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染，建议更换缓冲液。（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样。（3）电压太高。（4）适当把你的胶的浓度加大。（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照。
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向着目标前进！
7楼2011-09-25 16:11:41
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jlh02051118

银虫 (小有名气)
多谢各位的同仁，针对所有的可能今天做了试验，可情况没改善多少。第一，胶1%凝了一个小时，很平整的。第二，50*tae 配方参照分子克隆指南（我们实验室经常用的）重新配的。第三电压60V。恒压。第四Marker做了对照也有拖尾。现在唯一没变的就是染料。
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8楼2011-09-25 20:46:06
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