应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切的时候，条带成糊状，一片。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2432  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

[求助] 酶切的时候，条带成糊状，一片。

用fermentas的酶 进行酶切，条带成糊状，一片。小试如此，大切也是如此。
原来质粒是pET-28a的，7700bp，酶切后，HInd3，Xba1，Nde1，Sca1（单酶切位点）酶都用过，条带跑到了几百bp的位置，和未酶切的一起电泳的对比（没有存图）相距很远。如果是大切的话，就是一段糊状的条带。请问是什么原因？
酶污染了DNA酶了？还是怎么？

[ Last edited by sayfxxk2u on 2011-9-2 at 22:08 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-02 22:07:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sayfxxk2u

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yguang at 2011-09-03 00:24:12:
如果确定质粒本身没问题，酶也没问题的话，减少酶量缩短酶切时间试试！

我没有减少上样量，就是减少了下酶切时间，从3个小时减少到半个小时。。酶量减少了10u，条带是一条，没有糊，但是没有做酶切3个小时时候的对照（不知道这个切3个小时会不会糊），因为换了相同质粒的不同管。
赞一下 回复此楼
7楼2011-09-05 13:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

liukgg

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 最近很活跃啊 2011-09-03 07:44:49
sayfxxk2u(金币+1): 谢谢 2011-09-05 13:34:01
sayfxxk2u(金币+4): 2011-09-05 19:43:12
如果用了多种酶切后结果还是这样的话，酶污染的可能性不是太大，如果不放心可以换支新的酶试一下。再就是对质粒进行一下鉴定，确保是你要的质粒，根据图谱找上几个多酶切位点切一下就行。然后就是调整一下酶切条件及电泳条件，大切模糊的话可能和上样量有关，建议缩小一下上样量看看
赞一下(1人) 回复此楼
山水凤凰
2楼2011-09-02 23:47:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yguang

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-03 07:44:58
sayfxxk2u(金币+1): 谢谢 2011-09-05 13:35:14
sayfxxk2u(金币+4): 2011-09-05 19:43:06
如果确定质粒本身没问题，酶也没问题的话，减少酶量缩短酶切时间试试！
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-09-03 00:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半导体与导体

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

考虑酶的星号活性
赞一下 回复此楼
4楼2011-09-03 08:16:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295求调剂 +4 wei-5 2026-03-26 4/200 2026-03-28 23:20 by 小木虫tim
[考研] 321求调剂 +6 璞玉~~ 2026-03-25 7/350 2026-03-28 17:48 by 璞玉~~
[考研] 一志愿华北电力大学能动专硕，293，求调剂 +3 15537177284 2026-03-23 5/250 2026-03-28 16:11 by xxxsssccc
[考研] 一志愿北京工业大学，324分求调剂 +4 零八# 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:01 by 17865157980
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 085404求调剂，总分309，本科经历较为丰富 +4 来财aa 2026-03-25 4/200 2026-03-28 07:41 by 棒棒球手
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。，。，。，。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭