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ppt1210至尊木虫 (著名写手)
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跑2D电泳遇到问题，求解
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昨天在配SDS缓冲液的时候遇到了问题，一直不溶，在大家帮助下解决了，今天又遇到了新问题。还是与缓冲液有关，在跑2D第二相的时候，跑到1/3左右的时候就跑不动了，biorad的电泳仪显示E01，刚开始以为是仪器问题，重开，然后看了在220V电压下的下电流只有20-30mA，过一会儿就又不行了。换了仪器还是一样，显示E01。于是想到可能是新配的SDS缓冲液的问题，赶紧换上之前师姐配的那些缓冲液，就能正常运行了。唉，中间间断了近1个小时，不知道sample会不会受很大影响。。 下面是我配缓冲液的比例以及所用试剂，为何配的SDS electrophoresis running buffer总有沉淀？ 配置跑SDS-PAGE用的电泳液时候，先配10倍的，用时在稀释成1倍的，具体配方如下： 250mM Tris base, 1.92 M glycine, 1% SDS, 加水到1L, 具体称了 30.3 g Tris base,144.1g Glycine, 10 g SDS, Tris base: sigma公司, 纯度>99.9% Glycine: 1L公司，纯度>99% SDS: USB公司， （最有可能出问题的是这个，这是02年的一瓶了，从隔壁借的，之前我们自己的用完了，前面两个药品都是新的。） 求大家帮忙分析下原因。 谢谢！！ 谢谢 |
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至尊木虫 (著名写手)
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3楼2011-09-02 11:15:51
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木虫 (著名写手)
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