24小时热门版块排行榜    

查看: 505  |  回复: 2

ppt1210

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 跑2D电泳遇到问题,求解

昨天在配SDS缓冲液的时候遇到了问题,一直不溶,在大家帮助下解决了,今天又遇到了新问题。还是与缓冲液有关,在跑2D第二相的时候,跑到1/3左右的时候就跑不动了,biorad的电泳仪显示E01,刚开始以为是仪器问题,重开,然后看了在220V电压下的下电流只有20-30mA,过一会儿就又不行了。换了仪器还是一样,显示E01。于是想到可能是新配的SDS缓冲液的问题,赶紧换上之前师姐配的那些缓冲液,就能正常运行了。唉,中间间断了近1个小时,不知道sample会不会受很大影响。。

下面是我配缓冲液的比例以及所用试剂,为何配的SDS electrophoresis running buffer总有沉淀?

配置跑SDS-PAGE用的电泳液时候,先配10倍的,用时在稀释成1倍的,具体配方如下:
250mM Tris base, 1.92 M glycine, 1% SDS, 加水到1L,
具体称了 30.3 g Tris base,144.1g Glycine, 10 g SDS,

Tris base: sigma公司, 纯度>99.9%
Glycine: 1L公司,纯度>99%
SDS: USB公司, (最有可能出问题的是这个,这是02年的一瓶了,从隔壁借的,之前我们自己的用完了,前面两个药品都是新的。)

求大家帮忙分析下原因。
谢谢!!
谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我对人生无悔,奈何心中有愧。。。
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rb

木虫 (著名写手)

小笨虫虫

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+1): 溶了,现在问题是SDS缓冲液有问题,跑电泳不正常,电流很低,应该到130mA,的却只有30mA 2011-09-02 11:13:47
SDS不溶的话很好办,培养箱里面加加热就可以了。或者你看看实验室是不是空调温度太低了。
寝室楼的大爷、大妈都是哲学家,他们每天都在思考人类最根本的三个问题:你是谁?你从哪儿来?要去哪儿?
2楼2011-09-02 10:17:18
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ppt1210

至尊木虫 (著名写手)

不好意思,帖子编辑的时候有点问题,声明一下,沉淀问题已经解决,现在完全溶解了,要解决的问题是,SDS缓冲液用来跑2D的时候电流很小,不能正常使用,请帮忙分析原因
我对人生无悔,奈何心中有愧。。。
3楼2011-09-02 11:15:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ppt1210 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:15 by CLKTSgjM0Uqj
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-11 16:57 by Ai19911123
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +7 Tide man 2026-08-10 8/400 2026-08-11 15:49 by 铁帽子农民
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 6/300 2026-08-11 13:19 by JACS/Angew
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
请填处理意见