应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液PCR验证又失败了
21/1返回列表
查看: 3473  |  回复: 15
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

madengyu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-29 19:20:04
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)
小丹木木(金币+2): 鼓励交流 2012-02-27 17:40:09
本人做PCR较多，菌液PCR也不少，经常是一次性做一两百个的，而且是P长达11KB的片段，所以觉得做PCR还是有一定的运气，也就是指不稳定性。做菌液PCR最关键的如楼上所言：要做好阳性对照和阳性对照    这样就可以分析是反应体系还是反应条件的问题，而反应体系中最可能出问题的却是模板了，再者就是引物，为排除其它体系问题，对于新手可以用MIX反应液，现在很多公司都有卖，用起来方便，省去加样时出错；而反应条件里面最关键的就是退火温度了，至少菌液PCR，我习惯用较低一点儿的，50-55度，不过可根据自己的引物来定，其实总的来说，菌液PCR是非常容易扩增出来的。若基本排除所有可能的问题，找不到其它原因，可以再P一次，前提是你的阳性和阴性对照都是没问题的时候。第二次还没扩出来，那就是没有阳性克隆。欢迎交流！
赞一下 回复此楼
13楼2011-09-01 20:42:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 madengyu 的主题更新
21/1返回列表
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭