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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教一个关于GFP作为报告基因的问题
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babysandra

木虫 (小有名气)

[求助] 请教一个关于GFP作为报告基因的问题

本人不是学分子的，不太懂分子。听到有的实验室这么做过，但是不知道为什么，怎么弄的，形容出来大家帮忙解释一下。
他们做的是A基因。将A基因和GFP一起转入细胞，空白是只转入GFP的细胞。我知道是用病毒和shRNA转的。然后在荧光显微镜下观察时，有A基因表达的细胞，和只有GFP表达的细胞相比，GFP会相应降低表达。这样在观察时，只要有A基因，GFP表达就降低，这是怎么做到的呢。A基因和GFP怎么样建立起了这种联系。
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1楼 2011-08-14 21:40:22
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babysandra

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qingyuansw20 at 2011-08-15 17:00:02:
楼主说的是不是这个意思：
1、含有GFP报告基因的质粒上有实验者的目标基因。
2、利用病毒介导法转染到细胞，而A基因含有针对目标基因的shRNA。
3、这样同时转染A基因和GFP的质粒，在细胞内A基因要干扰GFP质粒的 ...

貌似是这个意思。但是目的基因就是A基因。我目的就是把A转到细胞里，用shRNA,病毒的方法，但是我不懂怎么转的。如果一个细胞转入的是GFP，另一个转入的是GFP+A。那想看到GFP+A中GFP的量，明显少于GFP细胞中的量。
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4楼2011-08-18 10:04:22
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邓远洪dyh

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

babysandra(金币+5): 2011-09-19 19:30:47
难道A基因是一个衰减子？
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2楼2011-08-15 15:19:07
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
babysandra(金币+5): 2011-08-18 09:58:24
dhd997(金币+5): good 2011-08-18 17:58:11
楼主说的是不是这个意思：
1、含有GFP报告基因的质粒上有实验者的目标基因。
2、利用病毒介导法转染到细胞，而A基因含有针对目标基因的shRNA。
3、这样同时转染A基因和GFP的质粒，在细胞内A基因要干扰GFP质粒的表达。自然GFP表达量下降。这是就证明了，在GFP质粒上的目标基因表达量下降。
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3楼2011-08-15 17:00:02
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