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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双荧光素酶报告系统相关问题
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dh555

新虫 (初入文坛)

[求助] 双荧光素酶报告系统相关问题

应用双荧光素酶报告系统检测某个蛋白对IFN通路的影响时，按浓度梯度转染该蛋白表达质粒所得到的结果和单转染某一浓度（此浓度值包括在梯度范围内）所得结果不一致，这是什么问题，求高人指教，非常感谢！
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1楼 2013-07-15 23:17:14
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肃清华书

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实验误差的问题吧。。你做的应该是浓度梯度的里面的一组平行实验对吧。
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2楼2013-07-16 06:48:54
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dh555

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肃清华书 at 2013-07-16 06:48:54
实验误差的问题吧。。你做的应该是浓度梯度的里面的一组平行实验对吧。

谢谢啊！是的。做浓度梯度时值（检测双荧光素酶报告基因的比值）均比空载对照高，但单转其中的某个浓度后值又比空载对照低，感觉操作也没啥问题....
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3楼2013-07-16 16:52:47
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Franksenny

金虫 (小有名气)

闷骚的疯子

【答案】应助回帖

双荧光报告肯定比单荧光报告的结果准确，因为单荧光报告很难保证基底的激活。如果双荧光中实验组比对照组高的倍数不是那么多，那么单荧光就有可能比Mock高。建议用双荧光报告检测，或者上传实验结果以供分析。
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方向加方法加努力等于成功
4楼2013-12-06 10:59:31
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