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dh555

新虫 (初入文坛)

[求助] 双荧光素酶报告系统相关问题

应用双荧光素酶报告系统检测某个蛋白对IFN通路的影响时,按浓度梯度转染该蛋白表达质粒所得到的结果和单转染某一浓度(此浓度值包括在梯度范围内)所得结果不一致,这是什么问题,求高人指教,非常感谢!
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肃清华书

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
实验误差的问题吧。。你做的应该是浓度梯度的里面的一组平行实验对吧。
2楼2013-07-16 06:48:54
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dh555

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 肃清华书 at 2013-07-16 06:48:54
实验误差的问题吧。。你做的应该是浓度梯度的里面的一组平行实验对吧。

谢谢啊!是的。做浓度梯度时值(检测双荧光素酶报告基因的比值)均比空载对照高,但单转其中的某个浓度后值又比空载对照低,感觉操作也没啥问题....
3楼2013-07-16 16:52:47
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Franksenny

金虫 (小有名气)

闷骚的疯子

【答案】应助回帖

双荧光报告肯定比单荧光报告的结果准确,因为单荧光报告很难保证基底的激活。如果双荧光中实验组比对照组高的倍数不是那么多,那么单荧光就有可能比Mock高。建议用双荧光报告检测,或者上传实验结果以供分析。
方向加方法加努力等于成功
4楼2013-12-06 10:59:31
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