应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr，RACE,低表达量基因的克隆
51/1返回列表
查看: 2806  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

满桌儿

金虫 (小有名气)

[求助] pcr，RACE,低表达量基因的克隆

新手求助，本人最近在做3‘RACE,是提取mRNA反转录做的，用了巢式PCR、也做了降落的，用了一个多月也没结果，实在郁闷，我有2个问题想请教下各位高手：1.我要做的基因表达的蛋白是膜内侧蛋白，表达量比较低，所以mRNA的量可能比较少，这应该怎么办呢？2.这个基因的CDS大概在800左右，我估计它的3’非编码区为200bp合适吗？  望各位高手帮忙解答下，小女子在此先谢过啦！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-10 13:14:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

满桌儿

金虫 (小有名气)
这样的啊，本来我还想提高下总RNA 浓度，看来没这个必要 了
赞一下 回复此楼
6楼2011-08-11 16:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

linyanfei

铜虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-10 16:20:30
先保证RNA的质量，只要引物设计的合理，再低量得RNA也能扩得出来！至于3‘非编码区，扩出来是多少就是多少！祝楼主实验顺利哈
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-10 15:48:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

满桌儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by linyanfei at 2011-08-10 15:48:20:
先保证RNA的质量，只要引物设计的合理，再低量得RNA也能扩得出来！至于3‘非编码区，扩出来是多少就是多少！祝楼主实验顺利哈

RNA的质量应该是没问题的，因为我们实验室有人用同一RNA做出来了
赞一下 回复此楼
3楼2011-08-10 16:08:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufei1010785

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-08-10 23:16:28
满桌儿(金币+1): 2011-08-11 16:24:20
非编码区一般都认为是200bp左右
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-10 20:24:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:44 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:22 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 6/300 2026-11-15 02:59 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 8/400 2026-11-15 02:26 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 8/400 2026-11-14 22:51 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 5/250 2026-11-13 11:15 by Equinoxhua
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-13 10:55 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请 +5 白白白ly 2026-11-09 5/250 2026-11-13 05:01 by wlf1982
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:36 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:41 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:36 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:00 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭