应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 问题请教-western blotting
151/1返回列表
查看: 2526  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

long2502

金虫 (小有名气)

[交流] 问题请教-western blotting

最近小弟在做WB，使用的是HRP-ECL发光法：将A、B发光液按等比例稀释混合均匀滴在PVDF膜上，然后暴光显影（时间大于五分钟），能把目的条带显出来，但是我的内参显示不出，最后用DAB显影，可以看到明显的内参的带。
请问师兄师姐，师弟师妹，大哥大姐，小弟小妹们，why? how to tackle the problem.
Thank you.

[ Last edited by 1949stone on 2011-8-7 at 11:31 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-08-03 08:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KinnerHuang

新虫 (初入文坛)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
首先恭喜你做出来啦！理论上内参也显示不出来 你加的一抗、二抗跟目的蛋白结合的 不跟内参结合的； HRP在二抗上 不跟内参结合 内参怎么会显影呢？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-04 10:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

long2502

金虫 (小有名气)
我的意思，能把目的条带做出来。然后再加B-actin一抗，过夜，然后加B-actin二抗，然后去显影，但就是显不出来了。就算我延长暴光时间还是白版了。目的条
带能显出来，说明提的蛋白或者跑胶，转膜都没有多大问题了。
赞一下 回复此楼
3楼2011-08-04 19:31:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴天1882

木虫 (正式写手)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
也不知道你在哪里提取的蛋白，会不会是此种内参蛋白不表达？根本没有内参蛋白，所以加完抗体也没有，重新选个内参看看
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-05 18:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzpbar

至尊木虫 (著名写手)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
没做过。友情帮顶。。
回复此楼
5楼2011-08-05 18:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明若瞳兮

新虫 (初入文坛)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
很可能是抗体不好了~~新配个抗体试试吧
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-08-06 21:11:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhu-hongwen

至尊木虫 (知名作家)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
学习。友情帮顶。
回复此楼
10楼2011-08-07 00:45:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luckey2880

木虫 (知名作家)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
学习帮顶
回复此楼
11楼2011-08-07 07:15:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青米

银虫 (正式写手)
★
long2502(金币+1): 谢谢参与
学习。友情帮顶。
回复此楼
14楼2013-04-06 21:28:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gcworm

木虫 (职业作家)
路过，帮顶一下
回复此楼
15楼2013-04-06 22:36:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
sa100200316楼
2011-08-05 19:20   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
blackrose80898楼
2011-08-06 21:14   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
7楼: Originally posted by 明若瞳兮 at 2011-08-06 21:11:34: 很可能是抗体不好了~~新配个抗体试试吧

xuanzhang9楼
2011-08-06 21:35   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
1517209054312楼
2011-08-07 07:29   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
顶一下
fuyouzhi13楼
2011-08-07 07:49   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 long2502 的主题更新
151/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭