应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 问题请教-western blotting
151/1返回列表
查看: 2192  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

long2502

金虫 (小有名气)

[交流] 问题请教-western blotting

最近小弟在做WB，使用的是HRP-ECL发光法：将A、B发光液按等比例稀释混合均匀滴在PVDF膜上，然后暴光显影（时间大于五分钟），能把目的条带显出来，但是我的内参显示不出，最后用DAB显影，可以看到明显的内参的带。
请问师兄师姐，师弟师妹，大哥大姐，小弟小妹们，why? how to tackle the problem.
Thank you.

[ Last edited by 1949stone on 2011-8-7 at 11:31 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-08-03 08:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KinnerHuang

新虫 (初入文坛)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
首先恭喜你做出来啦！理论上内参也显示不出来 你加的一抗、二抗跟目的蛋白结合的 不跟内参结合的； HRP在二抗上 不跟内参结合 内参怎么会显影呢？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-04 10:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

long2502

金虫 (小有名气)
我的意思，能把目的条带做出来。然后再加B-actin一抗，过夜，然后加B-actin二抗，然后去显影，但就是显不出来了。就算我延长暴光时间还是白版了。目的条
带能显出来，说明提的蛋白或者跑胶，转膜都没有多大问题了。
赞一下 回复此楼
3楼2011-08-04 19:31:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴天1882

木虫 (正式写手)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
也不知道你在哪里提取的蛋白，会不会是此种内参蛋白不表达？根本没有内参蛋白，所以加完抗体也没有，重新选个内参看看
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-05 18:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzpbar

至尊木虫 (著名写手)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
没做过。友情帮顶。。
回复此楼
5楼2011-08-05 18:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明若瞳兮

新虫 (初入文坛)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
很可能是抗体不好了~~新配个抗体试试吧
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-08-06 21:11:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhu-hongwen

至尊木虫 (知名作家)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
学习。友情帮顶。
回复此楼
10楼2011-08-07 00:45:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luckey2880

木虫 (知名作家)
★
long2502(金币+1):谢谢参与
学习帮顶
回复此楼
11楼2011-08-07 07:15:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青米

银虫 (正式写手)
★
long2502(金币+1): 谢谢参与
学习。友情帮顶。
回复此楼
14楼2013-04-06 21:28:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gcworm

木虫 (职业作家)
路过，帮顶一下
回复此楼
15楼2013-04-06 22:36:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
sa100200316楼
2011-08-05 19:20   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
blackrose80898楼
2011-08-06 21:14   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
7楼: Originally posted by 明若瞳兮 at 2011-08-06 21:11:34: 很可能是抗体不好了~~新配个抗体试试吧

xuanzhang9楼
2011-08-06 21:35   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
1517209054312楼
2011-08-07 07:29   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
顶一下
fuyouzhi13楼
2011-08-07 07:49   回复  
long2502(金币+1):谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 long2502 的主题更新
151/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +3 allen-yin 2026-03-23 3/150 2026-03-23 11:29 by 奶油草莓.
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +3 jiajunX 2026-03-22 3/150 2026-03-22 19:32 by brblmd
[考研] 生物学071000 329分求调剂 +5 我爱生物生物爱� 2026-03-17 5/250 2026-03-22 16:42 by tcx007
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭