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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 问题请教-western blotting
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long2502

金虫 (小有名气)

[交流] 问题请教-western blotting

最近小弟在做WB，使用的是HRP-ECL发光法：将A、B发光液按等比例稀释混合均匀滴在PVDF膜上，然后暴光显影（时间大于五分钟），能把目的条带显出来，但是我的内参显示不出，最后用DAB显影，可以看到明显的内参的带。
请问师兄师姐，师弟师妹，大哥大姐，小弟小妹们，why? how to tackle the problem.
Thank you.

[ Last edited by 1949stone on 2011-8-7 at 11:31 ]
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1楼 2011-08-03 08:28:12
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long2502

金虫 (小有名气)
我的意思，能把目的条带做出来。然后再加B-actin一抗，过夜，然后加B-actin二抗，然后去显影，但就是显不出来了。就算我延长暴光时间还是白版了。目的条
带能显出来，说明提的蛋白或者跑胶，转膜都没有多大问题了。
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3楼2011-08-04 19:31:21
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