| 查看: 652 | 回复: 2 | |||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||||
[求助]
关于质粒单酶切
|
|||||
| 若是所提质粒浓度较低，用来单酶切或双酶切时要注意些什么么？我酶切完以后还要切胶回收的。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有127人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于酶切的小问题
已经有10人回复
- 质粒DNA提取成了这样，请大家帮忙分析一下
已经有27人回复
- 求助：关于重组质粒目的条带丢失
已经有9人回复
- 质粒单酶切出现两条带
已经有18人回复
- 【求助/交流】单酶切酶和DNA的比例，体系大小的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】质粒，酶切前比酶切后跑的还快，神了？？！！！
已经有15人回复
- 【求助/交流】质粒单酶切后竟然两条带
已经有32人回复
- 【求助/交流】关于酶切产物连接的一点问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】酶切后无任何条带是什么原因？
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于克隆连接
已经有15人回复
- 【求助/交流】在构建基因表达载体的时候什么时候需要人为地在上面加上启动子？
已经有6人回复
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16348.8
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3652
- 在线: 289小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-07-30 22:47:34
liuwei78(金币+5): 2011-07-31 08:59:20
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-07-30 22:47:34
liuwei78(金币+5): 2011-07-31 08:59:20
|
如果质粒浓度太低的话做酶切也可以，但是为什么楼主不想一下为什么质粒浓度提取出来浓度会低呢？当然了，这跟宿主菌和提质粒的步骤有很大关系； 浓度太低的话，载体可以多添加一些，酶切体积也可以大一些；当然了这要看你做酶切验证还是以后做下游工作，如果做酶切验证，20ul体系，30ul体系都可以做的；如果要进行下游工作的话，标准体系是50ul，也已大一些，这个视你质粒的多少了； 酶切完以后先电泳看看是否完全切开，然后再进行纯化，不然很影响下游工作，比如连接。。。酶切完终体积应该小一些，50ul的酶切体系可以浓缩到20或者30ul，这样便于后期工作。。。 祝好运！ |
2楼2011-07-30 17:19:25
3楼2013-04-10 16:18:47
10