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295249857

新虫 (初入文坛)

[求助] 与16S克隆文库有关的问题

现在本人在做矿土的16S细菌克隆文库的构建，但由于微生物少，第一次用27F,1492R矿不出来，所以想做巣式PCR从中间再找对引物扩，大家帮帮忙，提供对细菌16S通用引物啊，能建库的。
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1楼 2011-07-21 22:19:56
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 厉害 2011-07-22 12:19:03
引用回帖:
Originally posted by 295249857 at 2011-07-21 22:19:56:
现在本人在做矿土的16S细菌克隆文库的构建，但由于微生物少，第一次用27F,1492R矿不出来，所以想做巣式PCR从中间再找对引物扩，大家帮帮忙，提供对细菌16S通用引物啊，能建库的。

27F,1492R就要啊。再做一次PCR就ＯＫ了，没有必要再找个中间引物。
如果非要用中间引物，那就用799F和1378R扩增600bp的片段。
338F 518R扩增200bp的片段。
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3楼2011-07-22 08:44:00
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