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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 脱脂奶粉培养基灭菌
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yupeibin

禁虫 (正式写手)
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1楼 2011-07-17 17:42:22
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

yupeibin(金币+2): 谢谢 2011-07-17 22:48:39
脱脂奶粉浓度太高，我们以前一般只用0.5-1%，可以降低浓度试试；

其实产生沉淀没有关系的，微生物产生蛋白酶以后会把蛋白水解产生透明圈的！
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2楼2011-07-17 20:01:37
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龙儿无双

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

换培养基，用酪素培养基不就完了，费那些事干嘛
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3楼2011-07-18 10:44:43
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avaryli

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们实验室经常用脱脂奶粉保藏菌种，灭菌都是8磅，没有问题啊，不过脱脂奶粉是进口的，而且是用水配的5%的
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4楼2011-07-18 11:10:40
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by 龙儿无双 at 2011-07-18 10:44:43:
换培养基，用酪素培养基不就完了，费那些事干嘛

酪素不容易溶解，配制的时候先加点氢氧化钠溶液，再加水溶解，可以适当加热，最后要注意调PH到中性。
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5楼2011-07-18 12:26:47
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

yupeibin(金币+2): 谢谢 2011-07-18 14:41:50
115度 灭30min就可以了。。。
我们实验室就是这样的，不会有沉淀。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
6楼2011-07-18 12:47:51
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802311820

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yupeibin(金币+6): 谢谢 2011-07-18 14:42:02
提供一个冻干用脱脂牛奶的灭菌方法和条件，供参考：
1 按照12％（W/W）称取欲定量的脱脂奶粉，用蒸馏水将奶粉溶解。溶解时先加入少量水搅拌成浓稠均匀的奶昔，再将剩余的水加入，搅拌均匀。这样可以帮助奶粉溶解，防止不溶颗粒的产生，
2 将配好的脱脂奶溶液在电炉上加热，加热过程中要不断搅拌，防止容器底部的牛奶被烧糊，至刚刚沸腾时停止加热。
3  分装
4 灭菌时先将灭菌锅内注入适量水，将水烧开。 再将牛奶试管捆好放入，然后按照正常的灭菌程序进行灭菌，灭菌压力控制在0.6 kgf/cm2  ，时间为20min。 灭菌结束后尽快将牛奶试管取出，放入冷水中冷却。
5 检测：冷却后的牛奶放入30℃培养箱中保温培养3天，经证实牛奶试管中确实无菌生长，即可使用。

注意事项：对脱脂牛奶进行灭菌的时候，应注意控制好灭菌的压力（即温度）和时间，压力过高或时间过长都会使牛奶颜色变黄变深，压力不够也会使牛奶灭菌不彻底，甚至全部失败。灭菌过程应控制得当，既能将牛奶中的杂菌杀灭又不会过多破坏牛奶中的营养成分。
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7楼2011-07-18 14:08:28
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物
你将培养基分开灭菌.即牛肉膏 0.5g，蛋白胨 1g，NaCl 0.5g，，琼脂 2%，水 100ml，pH 7.0～7.2  121度20min
脱脂奶粉 3g 115度20min
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上善若水，水善利万物而不争
8楼2011-07-18 14:57:25
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bobo12250

金虫 (初入文坛)
其实温度太高灭菌的话牛奶是不可能不变性沉淀的。 最好的灭菌方法是单独将牛奶倒入小烧杯，先用70度得温水冲泡两分钟，并一直搅拌。然后放入微波炉内加热（小火），沸腾后马上取出搅拌...反复操作三次   再加入灭菌好的培养基内即可。不过操作时要小心染菌的问题，最好是在无菌操作台上进行！
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9楼2011-07-19 09:00:43
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fangkai302

铜虫 (初入文坛)
我第一次做的这个脱脂乳活化培养基的时候，没出现这种情况，我是110度  20min ，模式我调的是排气的那个功能没选
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10楼2011-07-19 14:30:55
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