应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » DH5α能否表达外源蛋白
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 4158  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhougama

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-07-15 19:33:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
scelab(金币+7, EPI+1): 谢谢热心交流 2011-07-16 09:01:35
可以表达，我用过的我100%确定！

我曾经提取过牛瘤胃内容物的宏基因组DNA，经过回收大片段之后与cosmid载体pWEB:TNC连接，转染大肠杆菌，原本没有带有任何质粒的DH5α，涂板，筛选纤维素酶基因时用的就是活性筛选法，筛选得到内切酶和葡萄糖苷酶若干。淀粉酶我没有筛选，但是师兄筛选得到过。

pWEB:TNC是克隆载体，不是表达载体，但是启动子是大肠杆菌可以识别的，所以表达起来完全没有问题。怕就怕真核生物的基因启动子不识别而已，原核的大概是可以的，虽然很难说是不是全部外源基因都可以表达。

DH5α也是克隆宿主，体内没有外源质粒，更不用说稀有密码子了，但是只要识别了启动子，多少都还是可以表达的。JM系列的克隆宿主也是可以表达的。

只要能识别启动子，应该是无论宿主是那个大肠杆菌菌株都能表达，就是表达出来有没有活性或者被不被降解的问题。

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-7-16 at 01:29 ]
赞一下(3人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-07-16 01:13:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

gwbk

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
scelab(金币+5): 谢谢交流 2011-07-15 22:08:21
DH5a
F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK- mK+), λ–
从基因型上来看，DH5a并不缺乏表达相关基因（这个确实不能缺），只是修饰限制系统hsdR17(rK- mK+)：限制缺陷，修饰正常，可使DNA甲基化，但不限制外源DNA 。

DH5a应该可以表达，要不然质粒上的抗性基因不表达菌就不能生长了。只不过是表达量的问题。我觉得可以表达的~我现在正在做这个，我直接用DH5a筛选抗性基因（筛选总可以吧）~以前没用过DH5a做抗性筛选。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-07-15 20:45:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhougama

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2011-07-15 21:59:42
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amose

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
对于真核基因，可能不会表达，毕竟转录翻译中有很多修饰不同
赞一下(1人) 回复此楼
路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
4楼2011-07-15 22:13:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600，专业课化工原理，320分求调剂 +4 大馋小子 2026-03-29 4/200 2026-03-29 23:12 by Evan_Liu
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +4 Nadiums 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:00 by 唐沐儿
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +10 leaflight 2026-03-24 10/500 2026-03-29 20:58 by goldfish51
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +14 Mr. Z 2026-03-25 14/700 2026-03-29 17:27 by 学员8dgXkO
[考研] 070300化学354求调剂 +6 101次希望 2026-03-28 6/300 2026-03-29 12:57 by 无际的草原
[考研] 调剂考研 +3 王杰一 2026-03-29 3/150 2026-03-29 08:09 by fmesaito
[考研] 0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分 +4 Shern—- 2026-03-28 4/200 2026-03-29 00:47 by 544594351
[考研] 356求调剂 +3 gysy?s?a 2026-03-28 3/150 2026-03-29 00:33 by 544594351
[考研] 312，生物学求调剂 +3 小译同学abc 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:32 by 落睿可思
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +15 荷包蛋hyj 2026-03-26 15/750 2026-03-28 04:13 by fmesaito
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭