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zhougama

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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
scelab(金币+7, EPI+1): 谢谢热心交流 2011-07-16 09:01:35
可以表达,我用过的我100%确定!

我曾经提取过牛瘤胃内容物的宏基因组DNA,经过回收大片段之后与cosmid载体pWEB:TNC连接,转染大肠杆菌,原本没有带有任何质粒的DH5α,涂板,筛选纤维素酶基因时用的就是活性筛选法,筛选得到内切酶和葡萄糖苷酶若干。淀粉酶我没有筛选,但是师兄筛选得到过。

pWEB:TNC是克隆载体,不是表达载体,但是启动子是大肠杆菌可以识别的,所以表达起来完全没有问题。怕就怕真核生物的基因启动子不识别而已,原核的大概是可以的,虽然很难说是不是全部外源基因都可以表达。

DH5α也是克隆宿主,体内没有外源质粒,更不用说稀有密码子了,但是只要识别了启动子,多少都还是可以表达的。JM系列的克隆宿主也是可以表达的。

只要能识别启动子,应该是无论宿主是那个大肠杆菌菌株都能表达,就是表达出来有没有活性或者被不被降解的问题。

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-7-16 at 01:29 ]
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-07-16 01:13:30
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