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如何在聚丙烯酰胺多孔材料中固定天然DNA
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wujiangjie
木虫
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[交流]
如何在聚丙烯酰胺多孔材料中固定天然DNA
各位大虾,我现在用聚丙烯酰胺的多孔材料和天然鱼精DNA物理吸附后,DNA泄露比较严重,我考虑利用AM上的氨基共价修饰DNA,但是那些方法都建立在修饰合成DNA基础上,比如修饰5'端,修饰DNA上的磷酸基团,可是我的是天然DNA,它是混合的,这些方法都不好修饰,请问有没有什么方法可以解决这个问题,让DNA不在泄露呢?谢谢!!!
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2011-07-12 19:39:04
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Blacksides
银虫
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wujiangjie(金币+1): 谢谢! 2011-07-13 07:48:53
你可以用共价键把DNA接到你的高分子上,当然这样有点麻烦。
如果想直接非共价键的话,电荷作用可以考虑。但是你的聚丙烯酰胺带电很弱,基本不太可能吸附DNA。而且如果在PBS里面进行的话,高的离子强度会让这一点微弱作用也被屏蔽掉。
DNA和正电荷的聚电解质比如(poly (aminoethyl acrylate)之间的作用比较强,因为两者分子链上的电荷密度高,协同起来形成的complex稳定性还是不错的,哪怕在PBS里面也会比较稳定。你可以共聚带正电的单体到聚丙烯酰胺上。
还要考虑DNA是单链还是双链的。单链的DNA的链自由度高,更容易静电作用,而双链DNA可以看做一根棒,作用应该弱些。试过才知道。
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6楼
2011-07-13 04:43:24
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peijianjun
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生物DNA吗 这样高级的东西 算是高科技
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2011-07-12 20:39:45
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erics080
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wujiangjie(金币+1): 谢谢 2011-07-12 22:16:05
在多空材料中间修饰一些带有正电基团,氨基就不错,可以利用静电相互作用来吸附压缩DNA
建议你去看一些关于DNA转染方面的文献
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3楼
2011-07-12 21:00:19
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wujiangjie
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Originally posted by
erics080
at 2011-07-12 21:00:19:
在多空材料中间修饰一些带有正电基团,氨基就不错,可以利用静电相互作用来吸附压缩DNA
建议你去看一些关于DNA转染方面的文献
谢谢你的回复!我的那个丙烯酰胺就是带氨基的,在pH=7下,应该是带正电的,但是和DNA混合作用,也就是我一开始提到的单纯的吸附下,是泄露很多DNA的,能麻烦您给我具体说说DNA转染对这个的帮助吗?谢谢了!
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4楼
2011-07-12 22:18:28
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