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嘻嘻118

铁杆木虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE中17.5% 的聚丙烯酰胺怎么配

需要分离一个6000-8000D的小分子蛋白,请各位大侠帮助一下我把,17.5% 的聚丙烯酰胺具体怎么配啊。我刚注册小木虫,这也是我的第一个帖子,谢谢大家了!
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分子菜鸟

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
嘻嘻118(金币+5): ★★★很有帮助 我只是这样猜测,这想法跟我不谋而合,越发肯定了我的想法 2012-02-29 14:25:32
缓冲液,temed,aps不用变,按你平常加的量加就可以了。胶母液和水要换算一下应该加多少。比如总体积为5ml,胶母液为30%的话,应该加入17.5÷30×5=2.92ml的胶母液,剩余体积用水补齐。
2楼2012-02-27 19:46:54
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
浓度太大,胶脆很容易破碎,跑小分子电泳,可以进行高浓度尿素进行电泳,具体方法你可以在网上查查,很久没做,记不清了
3楼2012-02-28 05:27:03
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
生工买。。。。。。。。。
4楼2012-02-28 08:44:53
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叶飞9880

木虫 (小有名气)

目标蛋白的分子量太小了,我建议还是Tricine–SDS-PAGE凝胶电泳好些,分辨率对小分子的蛋白会高于普通的SDSPAGE
5楼2012-03-01 08:54:21
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装子516

铁虫 (初入文坛)


新人来支持一下
6楼2012-03-01 15:51:22
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