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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE中17.5% 的聚丙烯酰胺怎么配
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嘻嘻118

铁杆木虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE中17.5% 的聚丙烯酰胺怎么配

需要分离一个6000-8000D的小分子蛋白，请各位大侠帮助一下我把，17.5% 的聚丙烯酰胺具体怎么配啊。我刚注册小木虫，这也是我的第一个帖子，谢谢大家了！
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1楼 2012-02-27 15:37:12
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
浓度太大，胶脆很容易破碎，跑小分子电泳，可以进行高浓度尿素进行电泳，具体方法你可以在网上查查，很久没做，记不清了
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3楼2012-02-28 05:27:03
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分子菜鸟

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
嘻嘻118(金币+5): ★★★很有帮助 我只是这样猜测，这想法跟我不谋而合，越发肯定了我的想法 2012-02-29 14:25:32
缓冲液，temed，aps不用变，按你平常加的量加就可以了。胶母液和水要换算一下应该加多少。比如总体积为5ml，胶母液为30%的话，应该加入17.5÷30×5=2.92ml的胶母液，剩余体积用水补齐。
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2楼2012-02-27 19:46:54
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
生工买。。。。。。。。。
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4楼2012-02-28 08:44:53
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叶飞9880

木虫 (小有名气)
目标蛋白的分子量太小了，我建议还是Tricine–SDS-PAGE凝胶电泳好些，分辨率对小分子的蛋白会高于普通的SDSPAGE
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5楼2012-03-01 08:54:21
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