24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1516  |  回复: 4

alicejie2005

银虫 (小有名气)

[求助] 想问一下关于rt-qPCR的问题

我做的实验是基因相对定量,18S做内参,现在做完反转录,正打算做荧光定量PCR,但是不知道是不是应该做标准曲线,也不知道应该用哪种相对定量方法,不过看到许多文献上都是用的2-△△CT。我现在是不是应该用我的cDNA稀释后做18S的标准曲线,然后就可以直接做目的基因的PCR了呢?刚开始实验,有许多不懂要请教的地方,有经验的人支支招呗,非常感谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生物学资料

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

感动你我的开心,是我们共同的冥想
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kfh2008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 经验之谈? 2011-07-10 09:17:28
引用回帖:
Originally posted by alicejie2005 at 2011-07-10 07:37:27:
我做的实验是基因相对定量,18S做内参,现在做完反转录,正打算做荧光定量PCR,但是不知道是不是应该做标准曲线,也不知道应该用哪种相对定量方法,不过看到许多文献上都是用的2-△△CT。我现在是不是应该用我的c ...

应该做标准曲线的。建议做管家基因,对比着做,这样最终结果比较准确。
2楼2011-07-10 08:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 欢迎讨论 2011-07-10 09:17:44
引用回帖:
Originally posted by kfh2008 at 2011-07-10 08:52:00:
应该做标准曲线的。建议做管家基因,对比着做,这样最终结果比较准确。

做相对定量不用做标准曲线吧?做绝对定量才用,相对定量只要有对照组和内参就可以了,不是吗?
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
3楼2011-07-10 09:00:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

倔强的投手

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-10 17:37:58
做相对定量不用做标准曲线
当然你做标准曲线的话可以看看你引物的扩增效率
如果是单纯就看相对定量,可以不做,没问题的
4楼2011-07-10 09:41:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicejie2005

银虫 (小有名气)

呵呵,3Q
感动你我的开心,是我们共同的冥想
5楼2012-03-16 07:41:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 alicejie2005 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 总分293求调剂 +7 加一一九 2026-03-25 10/500 2026-03-29 16:53 by 杨杨杨紫
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 压国家一区线,求导师收留,有恩必谢! +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 一志愿华北电力大学能动专硕,293,求调剂 +3 15537177284 2026-03-23 5/250 2026-03-28 16:11 by xxxsssccc
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 312求调剂 +9 上岸吧ZJY 2026-03-22 13/650 2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
信息提示
请填处理意见