24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

BioEPI: 4
应助: 49 (小学生)
金币: 3232.6
帖子: 2256
在线: 276.6小时
虫号: 548497

[交流] EK酶切后到底带不带多余氨基酸？

如图所示的表达质粒多克隆位点，如果用Nco I和Xho I 酶切插入目的序列，表达后用EK酶酶切。在酶切位点和目的序列N端之间肯定会多出来两到三个氨基酸是吧？
那为什么有些文章说EK酶切后其N段与天然蛋白质完全一样呢？
很费解。我认为不管用什么酶，怎么切，N端必然都会带几个多余氨基酸的。

[ Last edited by snoopyzxx on 2011-7-8 at 15:02 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

面上可以超过30页吧？已经有13人回复
网上报道青年教师午睡中猝死、熬夜猝死的越来越多，主要哪些原因引起的？已经有10人回复
为什么中国大学工科教授们水了那么多所谓的顶会顶刊，但还是做不出宇树机器人？已经有13人回复
什么是人一生最重要的？已经有8人回复
版面费该交吗已经有17人回复
体制内长辈说体制内绝大部分一辈子在底层，如同你们一样大部分普通教师忙且收入低已经有19人回复
【博士招生】太原理工大学2026化工博士已经有8人回复
280求调剂已经有4人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

提取的质粒跑出四条或者五条带，但酶切后只有一条带，是不是我的质粒污染了已经有18人回复
十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低已经有16人回复
Sau 3AI 酶切DNA片段无带怎么回事？已经有7人回复
16rRNA序列酶切后，带型相同的菌株被确认在哪个分类水平了？已经有9人回复
用TFA/DCM,除去氨基酸上的boc后，如何除去多余的TFA 已经有8人回复
酶切条带已经有21人回复
质粒单酶切出现两条带已经有18人回复
【求助/交流】纯化酶切后的膜蛋白做Western blot没条带，why？已经有9人回复
【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？已经有18人回复
【求助/交流】酶切后无任何条带是什么原因？已经有8人回复
双酶切后目的条带下出现多个条带的原因已经有9人回复
【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊已经有18人回复
【求助/交流】双酶切质粒后，目的条带浅且前方有模糊亮带已经有12人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-07-08 15:01:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

小周

铁杆木虫 (著名写手)

BioEPI: 2
应助: 42 (小学生)
金币: 11329.6
帖子: 1324
在线: 560.7小时
虫号: 688224

★
snoopyzxx(金币+1):谢谢参与

肠激酶由于专一识别5个氨基酸多肽(D-D-D-D-K-X1)并在赖氨酸的羧基上切割,是N末端融合通常选择的蛋白酶,在其他残基的不规则切割发生水平较低,这取决于蛋白质底物的构象(Choi et al.2001). 肠激酶轻链的分子量为26.3kDa. 一个单位定义为在23℃下切割50ug 融合蛋白在8小时内达到95%切割率所需的酶量.生化分析已经表明切割效率取决于D4K识别位点下游的X1 氨基酸残基.

可以不留多余的氨基酸的。