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酶切条带模糊?
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如题，酶切后跑电泳，110V左右，55mA左右，30min左右，酶切条带分别为120，100bp左右，最近感觉酶切的条带电泳后总感觉不太清晰（如下图所示：M-MARKER,1,2,3分别代表三种不同基因型，1包含酶切位点，3不含酶切位点，2为杂和子，其中3大小与PCR产物大小一样，电泳液也重新换过了，似乎没啥变化，（PS:最近电泳仪有些奇怪，以前都是恒压工作模式，最近变成了恒流模式，电压比以往小10多伏）。 求教，该怎么办呢？      |
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3楼2011-06-23 22:38:41
西瓜
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【答案】应助回帖
xwsooo(金币+1): 2011-06-23 22:37:23
xwsooo(金币+1): 这个是给第二个帖子的金币：） 2011-06-24 09:51:49
xwsooo(金币+1): 这个是给第二个帖子的金币：） 2011-06-24 09:51:49
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电泳时，由于电泳体系是不断变化的，恒压或恒流只能选择其一。选择恒压时，电流一般会随着电泳不断增大。当电流大于设定的最大值时，电泳仪会自动转成恒流模式。这是电泳仪的保护机制。 看电泳效果如何，看Marker就可以了（你的酶切产物我是没看出什么不妥）。后面两张图marker都跑弯了，我觉得还是缓冲液的问题，有没有重新配缓冲液试过呢？ 另外，也可以查看下电泳仪的电流参数，看是不是比以前设的更小了。或者干脆是有人由恒压改成了恒流…… |
2楼2011-06-23 19:35:54
西瓜
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4楼2011-06-23 23:25:06
